大鼠冠状动脉平滑肌细胞.PDF

大鼠冠状动脉平滑肌细胞 Cat NO.: CP-R079 一、产品简介 1. 产品名称：大鼠冠状动脉平滑肌细胞 2. 组织来源：冠状动脉组织 5 3. 产品规格：5×10 cells/T25细胞培养瓶 4. 细胞简介： 大鼠冠状动脉平滑肌细胞分离自冠状动脉组织；冠状动脉是供给心脏血液的动 脉，起于主动脉根部，分左右两支，行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则， 将冠状动脉的分布分为三型：右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主 动脉的第一对分支。左冠状动脉为一短干，发自左主动脉窦，经肺动脉起始部和左 心耳之间，沿冠状沟向左前方行后，立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间 沟下行，旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。它是构成 冠状动脉壁的主要细胞成分，细胞膜上分布着多种离子通道，如电压依赖性Na+通 道、多种Ca2+通道和K+通道；它们参与了静息电位的维持与细胞膜电位的复极化、 超极化，调节血管平滑肌的收缩及舒张功能，此外动脉粥样硬化的发展也涉及冠状 动脉平滑肌细胞增殖、炎症及凋亡等。因此，原代分离培养的冠状动脉平滑肌细胞， 对研究生理和病理状态下离子通道及血管张力变化机制具有非常重要的作用。冠状 动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭 形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈 长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长， 高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。 传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。 本公司生产的大鼠冠状动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合 5 差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5 ×10 cells/瓶；细胞经alpha-SMA免疫荧光鉴 定，纯度可达90% 以上，且不含有HIV-1、HBV 、HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌 等。 5. 培养基信息： DMEM[H] 、FBS 、平滑肌细胞生长添加剂、Penicillin 、Streptomycin等 我们推荐使用Procell大鼠冠状动脉平滑肌细胞专用完全培养基（产品货号：CM-R079 ） 作为体外培养大鼠冠状动脉平滑肌细胞的培养基。 二、细胞培养状态 发货时发送细胞电子版照片 武汉普诺赛生命科技有限公司 网站： 全国免费服务电话：400-650-3656 邮箱：techsupport@ sales@ 三、使用方法 在Procell技术部标准操作流程下，大鼠冠状动脉平滑肌细胞可传8代左右，随着传 代次数的增加，细胞会呈现老化状态，生长速度减缓，4代以内细胞状态最佳；建议您 收到细胞后尽快进行相关实验。 客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。 1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO 、饱和 2 湿度的细胞培养箱中静置3-4h ，以稳定细胞状态。 2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。 3. 细胞传代 1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次； 2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培 养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min ；倒置显微镜下观察，待细 胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化； 3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2-1:3适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培 养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养； 4) 待细胞完全贴壁后，培养观察；之后每隔2-3天更