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HPLC法测定枸橼酸西地那非片含量【摘要】用高效液相色谱法测定枸橼酸西地那非片的含量。采用C18柱，以0.05mol/L磷酸三乙胺（ph3.0）-甲醇-乙腈（58:25:17）为流动相，检测波长为290nm，辅料不干扰测定。线性为：0.08~0.7ug，（r=0.9999）；平均回收率：99.7%，RSD=0.23%。 【关键词】高效液相色谱法 枸橼酸西地那非 中图分类号：R927.2文献标识码：B文章编号：1005-0515（2011）1-196-01 枸橼酸西地那非用于治疗各种原因引起的阳痿。本文采用HPLC法测定枸橼酸西地那非片的含量，操作快速，结果可靠，重现性好。 1 仪器与试药 高效液相色谱仪：岛津LC-2010C 试药：枸橼酸西地那非对照品及片剂均为大连辉瑞制药厂提供；甲醇，乙腈为色谱纯试剂，其他试剂均为分析纯。 2 试验方法 2.1 系统适用性试验 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：0.05mol/L磷酸三乙胺（ph3.0）-甲醇-乙腈（58:25:17）；检测波长：290nm；进样量20ul；理论板数按西地那非计应不低于3000。 2.2 专属性试验 按处方配比配置不含枸橼酸西地那非的样品溶液，按上述方法试验，证明辅料不干扰枸橼酸西地那非片的含量。 2.3 进样量与峰面积关系试验 精密称取枸橼酸西地那非对照品约35mg，置250ml量瓶中，加入5ml乙腈-水（9:1）溶液，超声5分钟，加水至刻度，摇匀，精密量取1,3,5,7,9ml，分别置25ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，精密量取20ml进样，进行线性回归，回归方程为：Y=-4.48×103+1.749×106X，r=0.9999，进样量按西地那非计0.08～0.7ug线性关系良好。 2.4 回收率试验 精密称取枸橼酸西地那非对照品适量，分别制成相当于100%标示量3份，相当于120%标示量3份，按处方配比加入辅料，按“3”条测定回收率，平均回收率为99.0%，RSD为0.23%。 2.5 精密度试验 精密量取同一样品5份，按“3”条试验，平均结果为99.5%，RSD为0.90%。 2.6 溶液的稳定性试验 取同一样品溶液于0,1,3,5,7h测定，RSD为0.40%。 3 含量测定 取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于西地那非25mg），置250ml量瓶中，加入5ml乙腈-水（9:1）溶液超声5分钟，加水至刻度，离心分离，精密量取上清液5ml，置25ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，精密量取20ul进样，按外标法以峰面积计算，3批结果分别为：99.4%，99.6%，99.5%。 4制剂稳定性试验 将本品分别置于光照，40℃,60℃，80℃及92.5%湿度条件下，放置10天，分别于1,3,5,10天取样测定含量，结果表明含量无明显变化，该制剂稳定。 5 结论 a．通过对不同流动相系统的筛选，本实验应用了离子抑制色谱的原理，用酸性缓冲液与有机相以适宜的配比构成了流动相，此系统能够有效分离可能产生的杂质，获得满意的结果。 b．试验结果表明，本方法快速，可靠，准确，可有效测定片剂的含量。该制剂稳定性好，可长期保管使用。 参考文献 [1]中华人民共和国药典（2005版）. [2]王俊德.高效液相色谱法 北京：中国石化出版社，1992.132-138. 1