增强大肠杆菌犕犈犘2通路发酵生产抗癌药物紫杉醇前体.PDFVIP

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2017-08-12 发布于江苏
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增强大肠杆菌犕犈犘2通路发酵生产抗癌药物紫杉醇前体

第卷第期重庆大学学报４０７Ｖｏｌ．４０Ｎｏ．７年月ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｏｎｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔ２０１７７ｇｑｇｙＪｕｌ．２０１７：／ｄｏｉ１０．１１８３５．ｉｓｓｎ．１０００５８２Ｘ．２０１７．０７．０１２ｊ增强大肠杆菌犕犈犘２通路发酵生产抗癌药物紫杉醇前体黄晓斌，仲蕾蕾（重庆大学生命科学学院，重庆４０００４４）摘要：用合成生物学的方法构建模块，使大肠杆菌遗传背景发生改变，生产红豆杉次生代谢　产物紫杉醇前体物质——— （），（）紫杉二烯（）。首先，用基因工程操作手段构建４５１１１２Ｔａｘａｄｉｅｎｅ（，甲基赤藓糖醇磷酸途径）模块，这个模块ＭＥＰ２２ＣＭｅｔｈｌＤＥｒｔｈｒｉｔｏｌ４Ｐｈｏｓｈａｔｅ２Ｃ Ｄ ４ ｙｙｐ包括个基因：、、和，个基因的表达产物属于大肠杆菌固有途径中的几个酶蛋４ｉｓＣｉｓＥｉｓＨｉｓＧ４ｐｐｐｐ白；模块构建好后，通过电穿孔的方式把ＭＥＰ２转化到已含有上游ＭＥＰ１模块和下游ＴＧ模块的大肠杆菌中，改变大肠杆菌固有的遗传信息。再用异丙基硫代半乳糖苷（）诱导所转入基因的表ＩＰＴＧ达，最后用气相色谱质谱（）方法检测表达情况。成功构建模块；通过与模块  ＧＣＭＳＭＥＰ２ＭＥＰ１和模块的组合实验，模块能加强菌株表达紫杉二烯。结果表明，微生物大肠杆菌可以通ＴＧＭＥＰ２过基因工程改造手段来生产植物天然药物紫杉醇前体物质（），（）紫杉二烯以及其他中间体。４５１１１２关键词：合成生物学；生物发酵；（），（）紫杉二烯４５１１１２中图分类号：文献标志码：文章编号：（）Ｏ６５２．１Ａ１０００５８２Ｘ２０１７０７０９１０８　　犈狀犺犪狀犮犻狀犕犈犘２犘犪狋犺狑犪狅犳犈．犮狅犾犻狋狅犘狉狅犱狌犮犲狋犪狓狅犾狉犲犮狌狉狊狅狉犵狔狆，犎犝犃犖犌犡犻犪狅犫犻狀犣犎犗犖犌犔犲犻犾犲犻（，，，）ＳｃｈｏｏｌｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓＣｈｏｎｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔＣｈｏｎｉｎ４０００４４Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａ