Biospin真菌基因组DNA提取试剂盒.PDFVIP

Biospin 真菌基因组DNA 提取试剂盒 试剂盒组成 货号 BSC14S1 BSC14M1 试剂盒组成 50 人份 100 人份 LE Buffer 20 ml 40 ml DA Buffer 7.5 ml 15 ml 14ml 28ml E Binding Buffer （使用前加入28ml 无水乙醇） （使用前加入56ml 无水乙醇） G Binding Buffer 25ml 50ml 25.2ml 50.4ml Wash Buffer （使用前加入37.8ml 无水乙醇） （使用前加入75.6ml 无水乙醇） Elution Buffer 10ml 20ml Spin column 50 100 说明书 1 份 1 份 储存条件  保存于室温 （15-25℃）。  所有试剂可稳定保存18个月。 介 绍 本产品提供了一套从各种真菌中提取基因组DNA的简单、快速、经济的方法。 该方法是以 选择性Biospin膜系统为基础， 可以在1小时以内完成提取纯化。该方法的步骤简单，不需使用 特殊的昂贵设备，而且完全避免了与有毒试剂 （如酚、氯仿等）的接触。 通常，使用本产品可 以从100mg以下的真菌组织或5ml以下的酵母培养物中提取2.5～30 μg的基因组DNA。 提取纯化后的DNA，可以直接用于 PCR/Real-time PCR，sequencing，Southern blot， mutant analysis，SNP 等下游应用实验。 原 理 首先研磨粉碎的真菌组织或细胞在LE缓冲液裂解完全，基因组DNA被释放出来。在加入DA缓 冲液沉淀离心后，去除大部分杂质。然后，加入的E Binding 缓冲液，在适当的盐分及pH值的 作用下，DNA被特异吸附于Biospin膜上。通过洗涤，可将蛋白质等残留的杂质去除。最后使用 Elution Buffer将DNA从膜上洗脱下来，从而获得基因组DNA。 1 需要的配套设备和材料 * 无菌1.5ml离心管 * 各种规格移液器和无菌移液器吸头 * 离心机（最大转速14,000g） * 无水乙醇 * 漩涡振荡器 重要提示 1 请在第一次使用前，向Wash Buffer中加入乙醇 (无水) 并混合均匀。 2 请在第一次使用前，向E Binding Buffer中加入乙醇 (无水) 并混合均匀。 3 如果LE Buffer 中出现浑浊，请于37°C环境中适当温育，待浑浊物质消失后再使用。 4 配制Sorbitol buffer：准确称取18.217g山梨醇和3.7224g EDTA二钠盐，溶解于100ml 灭菌纯水中。 操作步骤 1 样本处理：a 对于子实体类真菌组织，在液化氮或冰浴中将真菌组织研磨粉碎。 b 对于液体真菌培养物，请取适当量培养物，9,000 x g 离心1分钟，并弃 去上清液。