毛细管电泳在农药主成份分析之应用.PDF

毛細管電泳在農藥主成份分析之應用 蕭懿民 目U t=:I 自從 1 960 年代及 1 970 年代發展 出 高 效液相 層 析 ( High performance 1 iquid chromatography , HPLC) 及凝 膠 電 站立 (Polyacrylamide gel electrophoresis , PAGE) 之後 ， 毛細 管 電泳 ( Cap i l l ary Electrophoresis , CE) 是新興的 分離技術 o 1980 年代Jorgenson 等人即證實可利 用CE 做微量且高 效的 分析 (Jorgenson and Lukas , 1981) 0 三干重 封、 非斤 矛斗 于支 成就 了 今無 日 的 CE ， 首先是 由 氣相層 析(Gas chromatography , GC) 衍化而來的 熔融石英毛細管，其次是由 HPLC發展而來的高感度吸收光偵測 器，以及傳統 PAGE的廣泛分離模式 D結合了這三種分離技術之 優點，使 CE兼具高解析與靈敏度。更由於 CE不會如 HPLC產生 具有毒性、燃性之廢液，又不會如 PAGE之染色偵測耗時，目前 CE 已 廣泛的被眾多 實驗室 所接受 ， 可補 強或取代原有的 層 析與 電泳分析技術o目前已成功地被應用在下列領域: 1 .生化分析: Amino acid 、 pe pt i de 、 pr o t e i n、 0 1 i gonuc 1eot {de 、DNA 及各 種生物體代謝產物。2 .藥物分析:各類水溶性、油溶性藥物、 化學合成藥物、基因工程藥物及中藥0 3 .光學異構物分析:各 類結構異構物及光學異構物( D， L 或 R ， S form) 0 4. 離子分 析:各種陰陽離子、有機酸根、金屬離子等 0 5 .石化產品分析: PTA 純度及各種polymer 分子量分析06. 環境分析 : 多 氯 、 多 茉 TAO 王震等環境污染物分析 0 7 .食品化學分析:各類食品添加物(如 色素、人工甘味、防腐劑等) ，與營養成份(如維生素、胺基 酸、蛋白質、酵類等)之分析。 CE 是一個 結構簡 單 的儀器 ( 見 圖 1. ) 0 一根細 內 徑 、 具有 彈性的石英毛細管，兩端置於緩衝液瓶中，瓶中與管內盛裝相 同的溶液，兩個緩衝液瓶中放置電極，將欲分離的樣品引入到 毛細管後，施加電場，分離便開始進行。光學檢測可在毛細管 的另一端直接透過管壁進行 D 將樣品引~入毛細管的進樣模式以流體力學方式應用最廣 聲j當毛貧農業藥物毒物試驗所技術專刊第 80號 o -1 一 泛，將樣品於進樣端力口氣壓入，或在毛細管的出口端抽真空引 入，或是利用虹吸現象將樣品引入。此外亦可以樣品管置換緩 衝液瓶，並施加電壓來進行電動進樣 o CE 操作 的 基礎是電 滲流(Electroendosmosis flow) 。 在 pH 3 的 情 況下 ， 石英毛細管表面會因-SiOH 基的 解離而 帶負 電，為了保持電荷平衡，緩衝液中的陽離子會在靠近毛細管表 面處聚積，而形成了所謂的電雙層，向毛細管兩端施加一個電 壓，組成擴散層的陽離子將被吸引到負極，形成電滲流 o電滲 流的強度隨著 pH值上升而上升，在鹼性的情況下，其速度比任 何樣品離子的遷移速度來得大 o所以，電滲流可以使幾乎所有 物種，不論其電荷性質如何，向同一方向移動，此特性可應用 在膠東電動力學毛細管色吉普層析 ( M i c e l l ar Electrokinetic Cap i I I ary Chromatography , MECC) 上 ， 為一分離 中 性及帶電荷 離子之技術 o CE 有 多 種操作方式 ，