不同启动子对于牛催乳素表达的调控作用-微生物所期刊联合编辑部.PDF

生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2008, October 25; 24(10): 1776-1782 Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@ © 2008 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved 研究报告 不同启动子对于牛催乳素表达的调控作用 1, 2 1, 3 丁志良 , 曾凡一 1 上海交通大学医学遗传研究所, 上海 200040 2 上海交通大学生命科学技术学院, 上海 200240 3 上海交通大学医学科学研究院, 上海 200025 摘 要: 在细胞水平上比较不同启动子对于牛催乳素(bPRL)表达的调控作用。分别构建了以 CMV 启动子、牛催乳素基 因启动子和山羊β-酪蛋白基因启动子作为调控元件的 bPRL 真核细胞表达载体, 分别命名为 pCMV 、pPRLP 和 pP1A3 。 将 3 种载体分别转染小鼠垂体瘤细胞和小鼠乳腺上皮细胞, 使用 RT-PCR 和定量 RT-PCR 分析 3 种启动子启动 bPRL 在 2 种细胞系中的表达效果。pCMV 在 2 种细胞中有效表达 bPRL; pPRLP 在 2 种细胞中的表达效果与 pCMV 接近; pP1A3 不在垂体细胞中表达, 在乳腺细胞中表达。pP1A3 具有乳腺表达特异性; pPRLP 能够在垂体和乳腺中高表达, 在其他组 织的表达特异性有待进一步研究。 关键词: 牛催乳素, 牛催乳素基因启动子, 山羊β-酪蛋白基因启动子, 表达载体 Regulation on the Expression of Bovine Prolactin Gene by Different Promoters Zhiliang Ding1,2, and Fanyi Zeng1,3 1 Shanghai Institute of Medical Genetics, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200040, China 2 School of Life Science Bio-Technology, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200240, China 3 Institute of Medical Science , School of Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200025, China Abstract: To compare the regulation effects by different promoters on bovine prolactin gene expression in different cell lines, three recombinant bovine prolactin expression vectors were constructed using different promoters, i.e., CMV promoter, bovine prolactin gene promoter and goat β-casein gene promoter, respectively named pCMV, pPRLP and pP1A3, which were transfected into two cell lines, mouse pituitary tumor cell strain