［pead：肝素：ngf］生物材料促进大鼠坐骨神经损伤恢复.pdfVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１６，３６（２）：６８７２ ＤＯＩ：１０．１３５２３／ｊ．ｃｂ 檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪殏 檪 殏 檪 技术与方法 檪 殏 檪 殏檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪 ［ＰＥＡＤ：肝素：ＮＧＦ］生物材料促进 大鼠坐骨神经损伤恢复   李　锐　蔡平讨　叶丽冰　张宏宇 　肖　健 （温州医科大学药学院浙江省生物技术制药工程重点实验室　温州　３２５０３５） 摘要　目的：探讨新型材料 ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅａｒｇｉｎｉｎｙｌａｓｐａｒｔａｔｅｄｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ）（ＰＥＡＤ）结合肝素包裹神经 生长因子组成的三元复合体比单纯运用ＮＧＦ治疗大鼠坐骨神经损伤效果明显，为临床治疗外周 神经损伤提供实验依据。方法：２４只２００ｇ左右Ｗｉｓｔａｒ大鼠，分成生理盐水组，ＮＧＦ组，ＮＧＦ凝聚 体三组，每组各８只，距梨状肌下缘远侧约１．５ｃｍ处运用静脉夹夹紧坐骨神经２ｍｉｎ，采用无创细 线（５／０）缝合肌肉和皮肤，并用碘伏进行消毒，ＮＧＦ组每天沿坐骨切迹肌注８０ｎｇＮＧＦ，持续３０天； ＮＧＦ凝聚体组仅在造模时肌注［ＰＥＡＤ：肝素：ＮＧＦ］复合体（内含２．４ｇ的ＮＧＦ）；生理盐水组给予 μ 等体积的生理盐水。术后每周运用脚步印迹法评价动物的行为学，并于３０天后灌流、收集各组损 伤侧坐骨神经，运用ＨＥ染色及投射电镜观察坐骨神经结构恢复情况，免疫荧光标记ＭＢＰ，观察其 蛋白的表达。结果：ＮＧＦ组，ＮＧＦ凝聚体组在行为学、病理结构及蛋白的表达远高于生理盐水组， 并且ＮＧＦ凝聚组的治疗效果优于ＮＧＦ组。结论：新型凝聚体［ＰＥＡＤ：肝素］包载ＮＧＦ具有明显 的促进周围神经损伤后的修复与再生作用，能够在一定程度上提高单纯运用ＮＧＦ治疗大鼠坐骨 神经损伤的不足，达到更加理想和显著的促恢复效果。 关键词　神经生长因子　坐骨神经损伤　凝聚体　肝素 中图分类号　Ｑ８１９ ［２］ 　　由肿瘤切除，先天性畸形，压缩，或挫伤等原因导 调节亦有促进损伤神经再生和修复的作用 。但 ＮＧＦ ［１］ 致的外周神经损伤发生在约２．８％的创伤患者 ，它可 有活性半衰期较短以及在生理条件下迅速灭活的缺 ［３］ 能会导致运动，感觉和自主神经功能的部分或完全丧 点 ，从而限制了ＮＧＦ的应用前景。故本实验采用新 失，因此，严重影响患者的生活质量。目前，临床上主 型凝聚体聚乙烯精氨酸天冬氨酸甘油二酯（ＰＥＡＤ）与 要采用自体神经移植或直接缝合的方法进行治疗，但 肝素通过静电相互作用包裹ＮＧＦ，达到保持ＮＧＦ的生 由于存在着供体神经有限及免疫排斥等缺陷导致该法 物活性及缓控其释放，以取得长久治疗外周神经损伤 应用受限。因此，寻找更有效的治疗方法成为医学工 的效果。 作者的终身奋斗目标。神经生长因子（ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈ １　材料与方法 ｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）是研究最透彻的神经营养因子之一。据报 道，在神经细胞的增殖和分化中起着至关重要的作用， １．１　实验动物及分组 以及在神经损伤后神经纤维的生长和轴突髓鞘再生的 　　２００ｇ左右的Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠２４只，随机分成生理