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Ribo RNAmax-T7 生物素标记转录试剂盒使用说明书产品介绍运输与
RiboTM RNAmax-T7 生物素标记转录试剂盒使用说明书 RN :R11074.1 产品介绍 RiboTM RNAmax-T7 生物素标记转录试剂盒是人工重组改造后的T7 RNA polymerase 和优化的反应体系组合得到的试剂盒。 它以 Biotin RNA Labeling Mix 为底物 ,利用含有 T7 启动子的 DNA 模板 ,从 T7 启动子下游开始 ,合成不 DNA 模板中反义链互 补的 RNA ,简单快速稳定地获得大量的带有 Biotin 标记的 RNA 分子。合成的带标记的 RNA 可用于 pull down ,Northern Blots , 原位杂交 ,RNA 酶保护实验等 RNA 功能实验研究。为方便客户对转录合成得到的 RNA 进行纯化 ,此试剂盒还提供了用于纯化 的配套试剂。 运输与保存 本试剂盒产品需低温运输。收到产品后 ,请于-20℃冰箱低温保存 ,可以稳定保存半年。使用前请混合均匀。 试剂盒组分 1. RiboTM RNAmax-T7 生物素标记转录试剂盒组成 序号 试剂组成 浓度 C11002-1(20T) 1 T7 Enzyme mix 40μl 2 T7 Reaction Buffer (5X ) 5X 80μl 3 DNA Control Template 20μl 4 Biotin RNA Labeling Mix 10mM 120μl 5 DNase I 1U/μl 20μl 6 Purification Assistant A 200μl 7 Purification Assistant B 40μl 本产品规格为 20 次 ,为方便客户使用 ,本产品配备 DNase I 用于 RNA 合成后去除反应体系中的 DNA 模板 ,以及纯化用试 剂实现 RNA 合成后的纯化回收。 2. 客户自备试剂 客户需要自备线性化 DNA 模板、预冷无水乙醇、预冷 70%乙醇、RNase Free Water 或 1 X TE 溶液及其它相关的实验试剂 耗材等。客户进行 RNA pull down 实验 ,需另行贩买磁珠。 热线电话:4006860075 QQ 咨询:4006860075 投诉电话:020 投诉邮箱:customer-care@ 1 / 4 使用流程 推荐实验条件 注:客户可根据具体情况进行优化 1. 线性化 DNA 模板的制备 本试剂盒以含有 T7 启动子的线性化 DNA 作为模板。DNA 模板可使用线性化后的质粒 ,避免线性化处理的 DNA 模板产生粘 性末端 ,如丌可避免则需要进行平末端化处理。线性 DNA 模板有纯度要求 ,丌可含有 RNase 污染 ,如有 RNase 污染 ,需去除 污染并重新回收 ;若模板来自于 PCR 产物 ,则需要对 PCR 产物进行纯化 ,去除引物、引物二聚体及非特异性 DNA 扩增产物等 杂质后方可进行转录反应。 只有检验合格的线性化 DNA 模板才能不本试剂盒配套使用 ,质量好的线性化 DNA 模板才能转录制备出高质量的 RNA。故经 纯化的线性 DNA 模板需要进行严格的质控 ,可使用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳进行质控 ,验证 DNA 模板线性化是否 完全 ,线性化片段大小是否正确 ,线性化的 DNA 模板片段条带是否单一等。 2. T7 体外转录反应体系的配置与转录实验操作
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