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环境污染物的酶修复
3.根据蛋白质分子大小的差别的分离方法 (1)透析与超滤 透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开。 超滤法是利用高压力或离心力,强使水和其他小的溶质分子通过半透膜,而蛋白质留在膜上,可选择不同孔径的泸膜截留不同分子量的蛋白质。 (2)凝胶过滤法 也称分子排阻层析或分子筛层析,这是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一。柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝胶(Sephadex ged)和琼脂糖凝胶(agarose gel)。 4.根据蛋白质带电性质进行分离 蛋白质在不同pH环境中带电性质和电荷数量不同,可将其分开。 (1)电泳法 各种蛋白质在同一pH条件下,因分子量和电荷数量不同而在电场中的迁移率不同而得以分开。值得重视的是等电聚焦电泳,这是利用一种两性电解质作为载体,电泳时两性电解质形成一个由正极到负极逐渐增加的pH梯度,当带一定电荷的蛋白质在其中泳动时,到达各自等电点的pH位置就停止,此法可用于分析和制备各种蛋白质。 (2)离子交换层析法 离子交换剂有阳离子交换剂(如:羧甲基纤维素;CM-纤维素)和阴离子交换剂当被分离的蛋白质溶液流经离子交换层析柱时,带有与离子交换剂相反电荷的蛋白质被吸附在离子交换剂上,随后用改变pH或离子强度办法将吸附的蛋白质洗脱下来。 5.根据配体特异性的分离方法-亲和色谱法 亲和层析法是分离蛋白质的一种极为有效的方法,它经常只需经过一步处理即可使某种待提纯的蛋白质从很复杂的蛋白质混合物中分离出来,而且纯度很高。这种方法是根据某些蛋白质与另一种称为配体的分子能特异而非共价地结合。 环境污染物酶修复的前景 采用酶修复土壤农药污染在理论和实践上均具有重要意义, 不仅可降低或去除农药的毒性, 而且使得农药生物修复更向高效、低耗、安全和实用等方面发展。 应用于土壤农药修复的两种酶类主要来自微生物和植物, 对固定化后酶及土壤中本身存在的漆酶和过氧化物酶特征了解较少, 需要对酶活性影响因素, 如在异质性土壤中有机、无机颗粒、温度、酸碱度、水分和通气等对酶活性的作用, 以及通过加入一些共代谢的苯酚类或非苯酚类的基质提高酶活性, 加快酶修复进程等方面加以系统研究。 农药生物降解主要是在微生物作用下进行的,归根结底是通过其分泌的酶来完成, 直接采用酶进行农药修复比微生物、植物处理更具有优势。 酶不受微生物代谢抑制剂影响; 酶对环境中营养等条件要求不高; 低浓物捕食者和毒物共存时能保持较高活性; 当微生物只能降解某些比较容易的化合物时, 酶可降解一些特定的污染物; 酶分子在土壤中具有较大的移动性;微生物吸收农药和大分子化学物质时需借助特定吸收机制(扩散和渗透) , 而酶不需要。 当然, 在实际应用中也存在缺点, 酶纯化和提取技术耗时长, 花费高; 酶可能不稳定; 需要辅酶因子,在应用中比较困难; 酶和污染物的相互作用会通过扩散受到抑制; 酶可能会被蛋白酶所降解。为此近年来, 通过采用固定化技术, 明显提高了酶的稳定性和使用期限, 使应用日趋向简单、实用、有效和低耗的方向发展。 * 主要内容 污染对环境微生物的影响 酶的提取方法 环境污染物酶修复的前景 污染对环境微生物的影响 对环境的影响 对生物的影响 对环境的影响 1.环境污染的定义 环境污染是指人类直接或间接地向环境排放超过其自净能力的物质或能量,从而使环境的质量降低,对人类的生存与发展、生态系统和财产造成不利影响的现象。具体包括:水污染、大气污染、噪声污染、放射性污染等。 2.环境污染对环境的影响 环境污染会给生态系统造成直接的破坏和影响,如沙漠化、森林破坏、也会给生态系统和人类社会造成间接的危害,有时这种间接的环境效应的危害比当时造成的直接危害更大,也更难消除。 温室效应、酸雨、和臭氧层破坏就是由大气污染衍生出的环境效应。这 种由环境污染衍生的环境效应具有滞后性,往往在污染发生的当时不易被察觉或预料到,然而一旦发生就表示环境污染已经发展到相当严重的地步。 环境污染的最直接、最容易被人所感受的后果是使人类环境的质量下降,影响人类的生活质量、身体健康和生产活动。例如城市的空气污染造成空气污浊,人们的发病率上升等等;水污染使水环境质量恶化,饮用水源的质量普遍下降,威胁人的身体健康,引起胎儿早产或畸形等等。 目前在全球范围内都不同程度地出现了环境污染问题,具有全球影响的方面有大气环境污染、海洋污染、城市环境问题等。随着经济和贸易的全球化,环境污染也日
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