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tRNA的3?-末端都是以CCA结尾。 3?-末端的A与氨基酸共价连结,tRNA成为了氨基酸的载体。 不同的tRNA可以结合不同的氨基酸。 tRNA的3?-末端连接氨基酸 tRNA的反密码子环上有一个由三个核苷酸构成的反密码子(anticodon)。 tRNA上的反密码子依照碱基互补的原则识别mRNA上的密码子。 tRNA的反密码子识别mRNA的密码子 tRNA的倒L三级结构 核蛋白体的组成 原核生物(以大肠杆菌为例) 真核生物(以小鼠肝为例) 小亚基 30S 40S rRNA 16S 1542个核苷酸 18S 1874个核苷酸 蛋白质 21种 占总重量的40% 33种 占总重量的50% 大亚基 50S 60S rRNA 23S 5S 2940个核苷酸 120个核苷酸 28S 5.85S 5S 4718个核苷酸 160个核苷酸 120个核苷酸 蛋白质 31种 占总重量的30% 49种 占总重量的35% 大肠杆菌的核蛋白体 蛋白质合成时形成的复合体 原核生物基因表达的特异性 五、核酸在真核细胞和原核细胞中表现了不同的时空特性 真核生物基因表达的特异性 核酸的理化性质 The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid 第四节 碱基的紫外吸收光谱 DNA或RNA的定量 A260 = 1.0 相当于 50μg/ml 双链DNA(dsDNA) 40μg/ml 单链DNA (ssDNA or RNA) 20μg/ml 寡核苷酸 确定样品中核酸的纯度 纯 DNA: A260/A280 = 1.8 纯 RNA: A260/A280 = 2.0 紫外吸收的应用 协同性的DNA解链 高温或极端的pH DNA的变性 部分变性DNA的电镜图像 增色效应(hyperchromic effect):DNA变性时其溶液OD260增高的现象。 DNA解链时的紫外吸收变化 DNA的解链曲线 连续加热DNA的过程中以温度相对于A260值作图,所得的曲线称为解链曲线。 解链过程中,紫外吸光度的变化达到最大变化值的一半时所对应的温度。 解链温度(melting temperature,Tm) G+C 含量越高,解链温度就越高。 解链曲线的变化 不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中,只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系,在适宜的条件可以在不同的分子间形成杂化双链(heteroduplex)。 核酸分子杂交(hybridization) 核酸分子杂交 研究DNA分子中某一种基因的位置。 监定两种核酸分子间的序列相似性。 检测某些专一序列在待检样品中存在与否。 核酸分子杂交的应用 第五节 核酸酶 Nuclease 5’ 5’ 3’ 3’ 外切位点 外切位点 内切位点 内切位点 章末小结 1.核酸的分子组成及连接各个单元的价键? 2.DNA和RNA分子的不同点有哪些? 3.DNA双螺旋结构模型的要点有哪些? 4.什么是正超和负超螺旋,哪种螺旋更具有生物学意义? 5.核小体是什么?它的组成特点是什么? 6.试述RNA的种类及其主要功能。 7.hnRNA加工成熟的大致过程分几步?真核生物mRNA的结构特点是什么? 8.tRNA分子的二级结构及重要结构的功能有哪些? 9.核酸在真核细胞和原核细胞中是怎样表现出时空特异性的? 10.什么是DNA 的变性和复性,它们是如何引发增色效应和减色效应的? (一)A型题 1.与 pCAGCT互补的DNA序列是___ A.pAGCTG B.pGTCGA C.pGUCGA D.pAGCUG E.pAGGUG 2.RNA和DNA彻底水解后的产物___ A. 核糖相同,部分碱基不同 B.碱基相同,核糖不同 C.碱基不同,核糖不同 D.碱基不同,核糖相同 E.碱基相同,部分核糖不同 3. DNA超螺旋结构中哪项正确___ A. 核小体由DNA和非组蛋白共同构成 B. 核小体由RNA和H1,H2,H3,H4各二分子构成 C. 组蛋白的成分是H1,H2A,H2B,H3和H4 D. 核小体由DNA和H1,H2,H3,H4各二分子构成 E. 组蛋白是由组氨酸构成的 4.tRNA的结构特点不包括___ A.含甲基化核苷酸 B.5末端具有特殊的帽子结构 C.三叶草形的二级结构 D.有局部的双链结构 E. 含有二氢尿嘧啶环 5. 有关mRNA的正确解释是___ A.大多数真核生物的mRNA都有5末端的多聚腺苷酸结构 B.所有生物的mRNA分子中都有较多的稀有碱基 C.原核生物mRNA的3末端是7-甲基鸟嘌呤 D.大多数真核生物mRNA 5端为m7Gppp结构 E.原核生物帽子结构是7
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