禽流感病毒m 基因与鸡iggfc基因在大肠杆菌中的 - 重庆理工大学学报.pdf

第２４卷 第１期 重 庆 理 工 大 学 学报（自然科学） ２０１０年１月 　 Ｖｏｌ．２４ Ｎｏ．１ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｏｎｇｑｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ） Ｊａｎ．２０１０ 禽流感病毒Ｍ 基因与鸡 ＩｇＧＦｃ基因在 ２ｅ  大肠杆菌中的融合表达和纯化 １ ２ １ ２ １ １ ２ 蔡家利 ，余　华 ，胡仁建 ，于　丽 ，刘海军 ，李静远 ，叶　芬 （１．重庆理工大学，重庆４０００５０；２．西南大学 动物科技学院，重庆　４００７１５） 摘　　　要：将含禽流感病毒Ｍ 蛋白膜外区（Ｍ ）且偶联了鸡ＩｇＧＦｃ片段的重组质粒ｐＥＴ３２ａ ２ ２ｅ （＋）的大肠杆菌，用终浓度为０．５ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧ在３７℃下诱导表达，获得了包涵体表达的目的蛋 白。Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ试验表明，Ｍ 能与兔抗禽流感Ｈ５阳性血清发生反应，且在４７ｋＤ处出现一 ２ｅ 条特异性条带，具有良好的免疫学活性．表达产物通过 Ｈｉｓ－Ｎｉ２＋柱亲和层析后，得到了较好的 纯化效果。本实验为进一步研究Ｍ 蛋白的生物学活性、检测方法及通用疫苗的开发奠定了 ２ 基础。 关 键 词：禽流感病毒；Ｍ 蛋白；ｐＥＴ３２ａ（＋）原核表达系统；纯化 ２ｅ 中图分类号：Ｒ３９２．１　　　　文献标识码：Ａ 文章编号：１６７４－８４２５（２０１０）０１－００３８－０４ ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＦｕｓｉｏｎＰｒｏｔｅｉｎｏｆＡｖａｉｎＩｎｆｌｕｅｎｚａ ＶｉｒｕｓＭａｔｒｉｘ２ｐｒｏｔｅｉｎＥｃｔｏｄｏｍａｉｎＳｅｇｍｅｎｔｓ（Ｍ ） ２ｅ ａｎｄＡｖａｉｎＩｇＧＦｃｉｎＥ．ｃｏｌｉＢＬ２１ １ ２ １ ２ １ １ ２ ＣＡＩＪｉａｌｉ，ＹＵＨｕａ，ＨＵＲｅｎｊｉａｎ，ＹＵＬｉ，ＬＩＵＨａｉｊｕｎ，ＬＩＪｉｎｇｙｕａｎ，ＹＥＦｅｎ （１．ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００５０，Ｃｈｉｎａ； ２．ＡｎｉｍａｌａｎｄＳｃｉｅｎｃｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏｌｌｅｇｅ，ＳｏｕｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４００７１５，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｐｕｒｐｏｓｅｐｒｏｔｅｉｎｏｆｉｎｃｌｕｓｉｏｎｂｏｄｙｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｓｏｂｔａｉｎｅｄｂｙｃｏｎｄｕｃｔｉｎｇｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｎｐｌａｓｍｉｄｐＥＴ３２ａｏｆＥ．ｃｏｌｉＢＬ２１，ｗｈｉｃｈｃｏｎｔａｉｎｓａｖｉａｎｉｎｆｌｕｅｎｚａｖｉｒｕｓｍａｔｒｉｘ２ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｃｔｏｄｏｍａｉｎｓｅｇｍｅｎｔｓ（Ｍ ）ａｎｄｃｏｕｐｌｅｓａｖｉａｎＩｇＧＦｃｓｅｇｍｅｎｔ，ｕｎｄｅｒｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆＩＰＴＧｏｆ０． ２ｅ ５ｍｍｏｌ／Ｌａｔ３７℃．ＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｓｔｈａｔＭ ，ｗｈｉｃ