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第三部分DNA复制
第二章染色体与DNA;DNA的复制(DNA Replication);DNA的复制特点 DNA的半保留复制 DNA的半不连续复制 复制的起点、方向和速度 复制的几种主要方式 ;2.3.1DNA的半保留复制(semi-conservative replication);DNA的半保留复制 Semi-conservative mechanism;DNA的半不连续复制(semi-discontinuous replication);半不连续复制Semi-discontinuous replication:冈崎片段Okazaki fragment;1、用3H脱氧胸苷短时间标记后提取DNA,得到不少平均长度为2-3kb DNA片段。 2、用DNA连接酶温度敏感突变株进行实验,在连接酶不起作用的温度下,有大量小片段累积,说明复制过程中至少有一条链首先合成较短的片段,然后再生成大分子DNA。 3、前导链的连续复制和滞后链的不连续复制在生物界是有普遍性的,因而称之为DNA的半不连续复制。;;半不连续复制;2.3.2 复制的起点、方向和速度;Replicon(复制子)is a unit of the genome in which DNA is replicated; contains an origin for initiation of replication. Replication fork(复制叉)is the point at which strands of parental duplex DNA are separated so that replication can proceed.;; 原核细胞DNA的半不连续复制过程;;参与原核生物DNA复制的有关酶类;;;;;DNA的复制过程所需的酶和蛋白质 酶和蛋白质 作用 拓扑异构酶 帮助解开复制叉前后的超螺旋结构 DNA解螺旋酶 解开超螺旋 Rep蛋白 帮助解开双螺旋 引物合成酶 合成RNA引物 单链结合蛋白 稳定单连区 DNA聚事酶III 合成DNA DNA聚合酶I 消除引物,填满裂隙 DNA连接酶 连接DNA末端 ;细菌、病毒和线粒体的DNA分子都是作为单个复制子完成复制的; 真核生物基因组可以同时在多个复制起点上进行双向复制,也就是说它们的基因组包含有多个复制子。;复制子;实验结果表明,无论是原核生物还是真核生物,DNA的复制主要是从固定的起始点以双向等速复制方式进行的。复制叉以DNA分子上某一特定顺序为起点,向两个方向等速生长前进。;A. DNA仅用[3H]胸腺嘧啶标记10 min 即压X光片; B. DNA在[3H]标记10 min 后又继续非标记合成10 min,??致X光片上的复制叉变长,银颗粒分布广而稀少。;2.3.3 复制的几种主要方式;环状DNA双链的复制-θ型; 1968年Gilbert提出滚环复制模型:;双链环状DNA;A rolling circle appears as a circular molecule with a linear tail by electron microscopy; 哪些DNA进行滚环复制?;D loops;谢谢!
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