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氨基酸定量分析
氨基酸的定量分析 —甲醛滴定法; 水溶液中的氨基酸为兼性离子,因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基。甲醛可与氨基酸上的—N+H3结合,形成—NH—CH2OH、—N(CH2—OH)2 等羟甲基衍生物,使N+H3上的H+游离出来,这样就可以用碱滴定N+H3放出H+,测出氨基氮,从而计算氨基酸的含量。 ;若样品中只含有单一的已知氨基酸,则可由此法滴定的结果算出氨基酸的含量。若样品中含有多种氨基酸(如蛋白质水解液),测不能由此法算出氨基酸的含量。 脯氨酸与甲醛作用后,生成的化合物不稳定,导致滴定后结果偏低;酪氨酸含酚基结构,导致滴定结果偏高。 ;三、材料、试剂与器具 ;四、操作步骤 ;2、用0.0200mol/L NaOH溶液滴定至溶液变微红色 注意:滴定管中溶液的初始位置和滴定结束时的位置; 滴定管的使用方法;五、计算;; 1、甲醛法测定氨基酸含量的原理是什么? 2、??据滴定结果,总结分析此法在实际应用中的 优缺点。 3、为什么氢氧化钠溶液滴定氨基酸的—N+H3基上 的H+,不能用一般的酸碱指示剂?
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