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第8章糖和糖苷-2
§ 8.4 糖和苷的分离方法 (I) -- 按分离原理(或分离方法)分类 ;8.4.2 利用 酸碱性或解离度差异 分离 利用 酸碱性 差异 8.4.2. 1 铅盐沉淀法(同前述) 8.4.2. 2 季铵盐/氢氧化物沉淀法 利用 解离度 差异 8.4.2. 3 离子交换法 (1) 离子交换 法 (2) 离子交换纤维素 层析法 (3) 使用硼酸处理的强碱性阴离子交换树脂法;8.4.2.2 季铵 盐/氢氧化物沉淀法 是一类乳化剂 结构式 见 教材 应用: 可将 酸性多糖从中性多糖中分离,;原理: 1. 季铵盐/氢氧化物 通常只与 酸性多糖 生成沉淀, 使之分离。 方法:控制季铵氢氧化物浓度可得到不同 酸性多糖 ,控制 pH 9。 2. 升高 PH,某些中性糖 也能被 沉淀 (—OH 的解离度 增大), 方法:在 不同 pH 下 分步 沉淀 (酸性、中性、碱性等) 得到 不同多糖。季铵盐/氢氧化物pH梯度沉淀 加入硼砂缓冲液,某些中性糖 也能被 沉淀 原理:糖与硼酸络和,增强酸度,P.76;利用解离度差异:; 去除: 选用: 得到: 注意事项: ;增大其 解离度;(2).离子交换纤维素层析法 (离子交换+纤维素层析) 阳离子交换纤维素 阴离子交换纤维素 常用型号:P103,一般了解 应用:分离酸性/碱性多糖 洗脱方法: 不同浓度的缓冲溶液; (3)硼酸处理的强碱性阴离子交换树脂 原理:中性糖 与 硼酸 络合(NP.77) 可 增加 酸 性 增大 解离度,能选择性交换。 洗脱方法: 不同浓度的 硼酸盐 溶液 应用: 单糖 、低聚糖、中性多糖 效果好 缺点: 洗脱体积大 后处理烦 ;8.4.2 利用 酸碱性或解离度差异 分离小结 两沉淀 (1)铅盐沉淀法(如前述) 盐 试剂 沉淀法 (2)季铵氢氧化物沉淀法 碱 试剂 沉淀法 三交换 (1) 离子交换法 (2) 离子交换纤维素层析法 (3) 使用硼酸处理的强碱性阴离子交换树脂层析法 ;§ 8.4 糖和苷的分离方法 (I) -- 按分离原理(或分离方法)分类 ;8.4.3 利用吸附性差异;应用: 注意事项:;分离 单糖 和 低聚糖 (含单糖数目多者, 下);1 先水洗 2 渐增洗脱液中的乙醇浓度;1.活性炭 预处理 方法: 盐酸液 煮沸,蒸馏水洗净 (2 – 3 mol/ L) 2.需要 增加 洗脱速度,方法: (1)加压 (2)装柱时,拌入等量硅藻土, 弊:会使吸附容量降低 (3)或用40-60目稍粗的炭;8.4.3 利用吸附性差异;§ 8.4 糖和苷的分离方法 (I) -- 按分离原理(或分离方法)分类 ;8.4.4 利用 差异;(1) 分离 分子量不同的 糖、苷 @ 例如,低聚糖、苷、或多糖。 大分子的糖( )洗下, 比较活性炭法: 大分子 ( )下;(2)分离 形状不同的 分子: 如 直链 和 支链 多糖 支链糖/苷 ( ) 下 @;分离 低聚糖和苷:用孔隙( )的 分离 多糖 用孔隙( )的 多糖 纯化去小分子杂质 用孔隙( )的;§8.4 糖和苷的分离方法 (I) -- 按分离原理(或分离方法)分类 ;8.5 糖和苷的分离方法 (II) -- 按分离目的分类 @ 8.5.1 8.5.2;8.5.1 除去 非糖杂质的 方法 ---- 制备(精制)总糖、总苷 思路? 寻找差异 首先要考虑性质差异; 糖; 糖;
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