Amycolatopsis sp．转化阿魏酸生产香草醛.pdfVIP

第43卷 第5期 工 业 微 生 物 V0I．43No．5 2013年 10月 IndustrialMicrobiology 0et．2013 doi：10．3969／j．issn．1001—6678．2013．05．006 Amycolatopsissp．转化阿魏酸生产香草醛 王兴林， 郑 璞 ， 刘 琼 (江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室，无锡 214122) 摘 要：从土壤中筛选得到的一株能转化阿魏酸为香草醛的茵株CCTCCM2011265，根据其生理 生化特性和 16SrDNA序列分析，将其初步鉴定为广温拟无枝酸茵(Amycolatopsiseurytherma)的变 种。初步试验结果得出的摇瓶转化条件为果糖 50g／L，酵母膏 1g／L，底物浓度 12g／L，装液量 3O mL／500mL，转化温度4OqC。放大到7L发酵罐，香草醛浓度达到8．63g／L，对阿魏酸摩尔转化率 56．2％ 。 关键词：香草醛；拟无枝酸茵；生物转化 香草醛 (3一甲氧基4-羟基苯甲醛)又名香兰素， 达到 1．27g／L和2．52g／L j。国内周庆礼等人筛 香茅醛，是最重要的芳香族化合物之一，主要应用于 选到一株链霉菌 (Streptomycessp．L1936)通过发酵 食品、饮料、香料和药物中。香草醛的主要来源是由 过程两次补加底物阿魏酸，香草醛产量为7．12g／ 石油化工产品愈创木酚、木质素等的化学合成 ， L J，许平等人利用链霉菌 (Streptomycessp．V一1)通 每年从香草兰豆荚中提取的天然香草醛只有40t， 过发酵过程添加树脂，使香草醛的产量最高达到 远不能够满足人们对健康和天然食品需求；化学法 19．2g／L，对阿魏酸的摩尔转化率为54．45％lo3，本 合成的香草醛不仅香型单一，而且合成过程中污染 实验室李永红、赵丽清等研究利用粗酶和纺锤芽孢 严重；微生物合成香草醛，生产过程环境友好，已经 杆菌将异丁香酚转化为香草醛，香草醛的产量分别 得到欧洲立法的承认 (EECNo1334／2008)，并越来 达到了2．46g／L和32．5 L_】,123；郑丽蓉、王明君 越受到人们的关注 J。 等研究了利用黑曲霉和朱红密孔菌两步转化阿魏酸 在微生物合成香草醛中，一些文献报道了以香 为香草醛，香草醛浓度达到2．8g／L¨引。本文报道 草醇、香草胺、松柏醇、藜芦醇、阿魏酸、香草酸、丁香 了一株新筛选的拟无枝酸菌(CCTCCM2011265)及 酚和异丁香酚等作为香草醛的合成前体物质，其中 其转化阿魏酸生产香草醛。 阿魏酸为前体合成香草醛最受关注，并有商业化产 1 材料与方法 品 。法国的Lesage—Meessen等人最先采用两步 法 ，即利用黑曲霉先将阿魏酸转化为香草酸，再由朱 1．1 材料 红密孔菌进一步转化成香草醛，其香草醛的浓度为 菌株Amycolatopsissp．CCTCCM2011265分离 0．237g／Ll4；Muheim等和 Rabenhorst分别报道了 自11份无锡、云南等地的土壤样品中，保藏于中国 用西唐链霉菌 (StreptomycessetoniiATCC39116)和拟 典型培养物保藏中心 ¨。标准品阿魏酸、香草醛、 无枝酸菌 (Amycolatopsissp．DMS9992)采用一步转 香草酸、香草醇和愈创木酚，阿魏酸(浙江银河药业 化阿魏酸生产香草醛，浓度分别达到 13．9g／L和 有限公司)市售。 11．5g／L 。意大利的Gioia等研究了假单胞菌 1．2 培养基 (Pseudomonassp．HR199)和大肠杆菌工程菌 (E 斜面培养