Paxillin在胃癌中表达及其意义.docVIP

Paxillin在胃癌中表达及其意义【摘要】目的探讨Paxillin在胃癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化方法检测了10例正常胃组织,10例胃不典型增生组织及50例胃癌术后标本中Paxillin表达。所有病例都随访两年。结果正常胃、胃增生和胃癌组织间Paxillin表达存在非常显著性差异;不同淋巴结转移状况的胃癌中Paxillin表达程度有显著性差异(P=0.018);不同Paxillin蛋白表达的患者两年内转移发生率存在显著性差异(P=0.024)。结论Paxillin可能作为胃癌早期转移的指标,并用此判断预后。? 【关键词】 Paxillin;胃癌;免疫组化 胃癌是我国恶性肿瘤发病率和死亡率最高的肿瘤之一,其转移过程是复杂的,探究胃癌侵袭转移的相关因子,对于胃癌转移的临床诊断和治疗具有重要意义。Paxillin是近年来发现的一种信号衔接蛋白(signal adaptor protein),主要存在于粘附斑,构成细胞与细胞外基质局部粘附关键部位。在细胞骨架与细胞外基质的粘附及细胞信息传导起重要作用,组织细胞中Paxillin表达的情况可反映有关的粘附动力学变化,对它的测定可反映癌细胞的侵袭转移能力??[1]?。本文拟通过免疫组织化学方法,10例正常胃组织,10例胃不典型增生组织及50例胃癌术后标本中Paxillin表达,并探讨这些表达与胃癌生物学行为的关系。? 1资料与方法? 1.1一般资料本研究50例胃癌标本来源于2006年7月至2007年7月间山西省汾阳医院收治的临床病历资料完整的胃癌术后标本,年龄33~72岁,所有病例术前均未进行放疗和化疗。具体构成为:肿瘤侵及肌层以内者23例,肿瘤侵及浆膜层者者27例;有淋巴结转移者31例,无淋巴结转移者19例;病理分级Ⅰ级14例,Ⅱ级20例,Ⅲ级16例。另收集同时期正常胃组织标本10例,胃不典型增生10例。? 1.2试剂和方法鼠抗人Paxillin单克隆抗体购自美国NeoMarker公司,S-P染色及DAB试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司,免疫组化染色前行常规HE染色,用于病理诊断、分型、分级。免疫组化染色采用SP法,标本用10%福尔马林固定,石蜡包埋,组织切片4 μm厚,置于涂有防脱片剂多聚赖氨酸的载玻片上,放入60℃烤箱2 h,常规脱蜡至水,用EDTA热修复抗原,加过氧化物酶阻断剂封闭内源性过氧化物酶;血清封闭,加入一抗(抗Paxillin单克隆抗体)4℃冰箱过夜,生物素化二抗、辣根酶标记链霉卵白素复合物室温下各作用30 min,二氨联苯胺(DAB)显色,苏木素复染,常规脱水、透明、封片。阴性对照用PBS代替一抗。所有患者都随访两年,每3个月全面检查1次。? 1.3阳性结果判定Paxillin蛋白阳性染色为在细胞膜和细胞浆中呈现黄色或棕色颗粒,境界清楚,无明显背景染色。蛋白表达评估标准??[2]?:①按染色强度计分:0分为无色,1分为淡黄色,2分为棕黄色,3分为黄褐色;②按阳性染色细胞百分率计分:高倍镜下每张切片选择10个有代表性的视野,每个视野计数 100 个肿瘤细胞,共计数1000个细胞。阳性细胞数≤10%为0分,阳性细胞数10%~25%为1分,25%~50%为2分,50%为3分。将①×②的结果分为以下等级:0分为阴性(-),1~2分为弱阳性(+),3~4分为阳性(++),大于5分为强阳性(+++)。最终结果是由两位病理医师用双盲法分别观察每例切片所得的平均分数来判定的。? 1.4统计学分析所有数据经SPSS10.0 统计软件处理分析,应用χ?2检验和确切概率计算法检验,以P 1