植物组织培养教程 李浚明2 3.pptVIP

* 第三节 植物离体培养体系的建立 一、植物组织培养的阶段划分： 通常将组织培养过程划分为四个阶段 1、起始培养阶段（诱导阶段） 2、增殖培养阶段 3、生根培养阶段 4、驯化移栽 Stage 0 – Selection preparation of the mother plant sterilization of the plant tissue takes place Stage I ?- Initiation of culture explant placed into growth media Stage II - Multiplication explant transferred to shoot media; shoots can be constantly divided Stage III - Rooting explant transferred to root media Stage IV - Transfer to soil explant returned to soil; hardened off Steps of Micropropagation 二、外植体起始培养（无菌体系建立） 起始培养阶段是指无菌体系的诱导和建立过程。主要受外植体、培养基、环境条件等因素的影响。 （一）外植体的起始培养过程 1、 起始培养的一般过程： A、选取适宜的基因型（品种）； B、选取适宜的外植体；常用外植体有茎尖、茎段、节间、叶片、叶柄等。 C、流水冲洗外植体； D、外植体切割、分离及灭菌处理； E、外植体接种于诱导培养基。 F、环境条件控制促进外植体的生长。 2、接种外植体的生长过程： A 细胞分裂的启动； B 细胞增殖； C 组织和器官的形成。 （二）影响外植体起始培养的因素： 1、影响外植体起始的因素 A 外植体的遗传基础及生理影响 B 培养基组成成分：矿物盐类、微量有机成分、生长调节物质、碳源、琼脂、活性炭、酚类化合物、多胺等。 C 培养条件：光照、温度、湿度 A 外植体 (1) 外植体种类及基因型 (2) 外植体供体植株和外植体的来源与生理状态 (3) 外植体大小 (4) 外植体的极性 外植体种类及基因型 单子叶植物不易诱导器官发生。 b. 木本植物较难诱导。 c. 存在基因型差异（如番茄29%~63%） d. 开始生长季节取材容易诱导。 外植体状态： 外植体大小： 外植体越小成苗能力越弱，较大的外植体增殖较快。 外植体极性： 当外植体以形态学的基部接种于培养基上时，从远离基部的表面诱导出芽、苗数目较多。 B、培养基 a 培养基类型: b 碳 源的影响: C、植物生长调节物质 a 细胞分裂素和生长素类 b 赤霉素类 c 乙烯及其生物合成抑制剂 d 其他有机化合物 细胞分裂素和生长素： a.部分植物单独使用细胞分裂素（CTK）可以形成 无根苗 b.部分植物无根苗的形成需要细胞分裂素和生长素配合使用。 c. 外源CTK与生长素必须维持适当比例以改变内源激素平衡，促进器官发生。 d. 不同细胞分裂素对分化的作用效果不同 e. 苯基脲衍生物具有较高的细胞分裂素活性 （4PU、CPPU 、TDZ） *