甘蓝型油菜显性核不育基因的AFLP标记及品种（系）的SSR指纹图谱分析.pdfVIP

捅要 油菜是我国主要的油料作物，选育高产优质油菜是育种的主要目标，而杂种优势利用是提高 油菜产量的主要途径。1985年李树林等在甘监型油菜显性雄性核不育利用研究中，首次报道了其 不育性是受二对显性基因控制，其中一对基因对另一对基因具有显性上位作用，并在此基础上提 出了显性核不育两系制种模式和三系制种模式，从而使显性核不育的杂种优势利用成为可能。 显性细胞核雄性不育具有败育彻底，不受环境影响，育性容易转育，生长发育正常等特点， 在油菜杂种优势利用和群体轮回改良方面具有重要的意义。实现显性核不育三系法制种，纯合两 型系的选育是基础，通过杂合两型系中的不育株与恢复系杂交，鉴定后代的育性分离情况，可以 选育出纯合两型系。为了更好地利用显性核不育杂种优势，提高育种效率，有必要结合分子标记 技术，开展分子标记辅助选择育种研究，同时结合亲本材料遗传距离分析，了解亲本材料间的亲 缘关系，为亲本材料在杂种优势中的利用提供分子水平的依据。 的遗传多样性。取得的主要实验结果如下： 鉴定F1代为全可育，在Fl代套袋自交的61个单株中，有35个单株在F2代发生了育性分离， 个单株的后代表现为全可育，符合对纯台两型系选育的预期设想。 AFLP酶切连接方法以及产物稀释倍数等条件的优化，发现将酶切和连接的步骤分开进行，会更 加有利于酶的活性，电泳检测结果条带清晰整齐；而酶切连接同时进行，同一个样品在不同的稀 释倍数下山现了不应有的主带差异，影响了实验结果的判断。得到的AFLP优化程序是：双酶切 连接产物稀释10倍作为预扩增的模板，预扩增产物用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测斤稀释30倍作为 选择性扩增产物的模板，用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测产物，银染显带。 3．在可育池A和不育池B中筛选了256对EcoRI和MseI引物组合以及224对PstI和Mse 冈之间的交换率仅为1．1％。将该标记片段回收测序后，属于油菜基因组序列的实际长度为108bp。 分材料区分开。聚类分析表明16个品种(系)在遗传距离o．56处可以分为四类，其中本课题组选 育的品种(系)分别聚为两类。表明它们亲缘关系还比较近，有必要选用遗传背景更为广泛的材 料用于杂种优势的利用。 关键词：甘蓝型油菜，显性核不育基因，杂合两型系，AFLP标记，SSR指纹图谱 Abstract in thecomlllOnandmain isoneofthe oilsecd China．Breedersstillface Rapeseed major crops goal of the levelof et forthefirsttimethatthe improvingproductionrapeseed．Lial(1985)hadproposed ofdominantmale a modeofinheritancewith digenic epistatic sterility genie sterility(GMS)followed as models．This establishedtwo-line andthree-line GMS interaction，and system system breeding ofGMStobea inBrassicaL andmodelsmadeheterosisutilization hypothesis primarystrategy napus breeding．