检测生物组织中的油脂糖类和蛋白质.docVIP

“检测生物组织中的油脂、糖类和蛋白质”复习导学 一、原理解释 利用化学试剂与生物组织中的有机化合物产生特定的颜色反应，从而确定该化合物的存在，因此可以利用化学试剂进入细胞内与相应的化合物结合显示出特有的颜色，如用苏丹Ⅲ检测油脂；也可以把细胞中的化合物提取出来，加入相应的化学试剂显示出特有的颜色，如糖类、蛋白质的检测。 1．本尼迪特试剂检测还原糖。可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与本尼迪特试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O沉淀。其反应的本质是：葡萄糖＋Cu(OH)2 葡萄糖酸＋Cu2O↓（砖红色）＋H2O，即Cu(OH)2被还原成Cu2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。 2．苏丹Ⅲ染液检测油脂。苏丹Ⅲ与油脂具有很强的亲和力，油脂可以被苏丹Ⅲ染液染成橙黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色），而其他非油脂物质则不易被染色。 3．碘－碘化钾检测淀粉。淀粉遇碘－碘化钾溶液显蓝色。 4．双缩脲试剂检测蛋白质。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液（双缩脲试剂A液）和质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液（双缩脲试剂B液）。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽健，在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲试剂（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu2+形成紫色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。 二、材料选择 1．做可溶性还原性糖鉴定实验，所选的材料中必须含有较多的还原性糖，而且要求颜色较浅以免干扰实验结果的观察，常选用颜色为白色的植物组织如苹果、梨，不能用甘蔗（还原糖含量很少）或西瓜汁、番茄汁（红色）代替。 2．做油脂的鉴定实验，应选富含油脂的浅色材料，如花生种子、蓖麻种子等，尤以花生种子为最好。实验前一般要浸泡3～4小时（如果是新花生种子，可以不必浸泡），若浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形。 3．做蛋白质的鉴定实验，动物材料可以选用蛋清，但蛋清溶液必须稀释防止实验后粘住试管，不易刷洗。若植物材料可用富含蛋白质的黄豆种子（或直接选用豆浆）。 三、方法步骤 1．还原糖鉴定 选材（含还原性糖多，颜色浅的植物组织）→制备组织样液（去皮→切块→研磨→过滤）→加样液2ml于试管A中（B试管中注入2ml蒸馏水）→加入2ml本尼迪特试剂→热水浴2～3min→观察颜色变化。A试管中溶液的颜色变化：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）。 2．油脂的鉴定 取花生种子（干种子要浸泡3～4小时）→切片→苏丹Ⅲ染色（2～3min）→50%的酒精溶液洗浮色（不洗去浮色，会影响对橙黄色脂滴的观察）→制片→观察（先在低倍镜下寻找花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橙黄色或红色圆形小颗粒。为了观察得更清楚，再用高倍镜进行观察）。 3．蛋白质的鉴定 制备组织样液（浸泡黄豆→去皮→研磨→过滤→成浆）→加样液约2ml于试管中→加入双缩脲试剂A，摇匀→再加入双缩脲试剂B液3~4滴，摇匀→观察颜色变化。 可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。 4．淀粉的检测和观察 选材（马铃薯）→制备组织样液→加待测组织样液约2ml于试管中→向试管内滴加几滴碘－碘化钾溶液（碘液不要滴太多，以免影响颜色观察）→观察颜色变化。 四、实验结果 检测样品 所含物质 蛋白质 还原性糖（如葡萄糖） 淀粉 油脂 实测结果 实测结果 实测结果 实测结果 稀释蛋清液 紫色 马铃薯匀浆 蓝色 白梨汁 红黄色 花生种子 橙黄色 五、巩固练习 1．下列能与本尼迪特试剂反应生成色沉淀的一组物质是（　　） ①葡萄糖　　②果糖　　③蔗糖　　④麦芽糖　　⑤淀粉　　⑥纤维素 A．①②⑤　　　　B．②③④　　　　C．①⑤⑥　　　　D．①②④ 2．在过氧化氢酶溶液中加入双缩脲试剂，其结果应该是（　　） A．产生气泡　　　B．溶液呈紫色　　C．溶液呈蓝色　　D．产生砖红色沉淀 3．关于生物组织中有机物鉴定的叙述，正确的是（　　） A．用双缩脲试剂处理葡萄糖显砖红色　　　B．用苏丹Ⅲ染液处理油脂显橙黄色 C．用本尼迪特试剂处理蛋白质显紫色　　　D．用碘液处理果糖显蓝色 4．在生物组织中可溶性还原糖、油脂、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是（　　） A．甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定 B．花生种子含油脂多且子叶肥厚，是用于油脂肪鉴定的理想组织材料 C．大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料 D．鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的理想动物材料 5．“检测生物组织中还原糖、油脂和蛋白质”的实验中，以下操作错误的是（　　） A．在可溶性还原糖的鉴定时，用热水浴加热产生