不同激素配比对铁皮石斛组织培养的影响研究.pdf

维普资讯 第26卷第 3期 惠州学院学报 (自然科学版) V01．26．No．3 2006年 6月 JOURNALOFHUIZHOUUNIVERSITY Jun．2oo6 不同激素配比对铁皮石斛组织培养的影响研究 陈兆贵，谭 俊 (惠州学院 生命科学系，广东 惠州 516007) 摘 要：在铁皮石斛组织培养过程中，通过筛选适宜铁皮石斛原球茎增殖、分化、壮苗和生根的培养基，以 提高增殖系数和试管苗的质量。结果表明：原球茎增殖以MS+NAA1．0mg／L+6一BAI．0mg／L+KT1．0ms／L为 最佳；原球茎分化以MS+NAA1．0mg／L+6一BA3．0mg／L+KT1．0m#L为最佳；壮苗生根以I／2MS+IBA2．0 mg／L+水解酪蛋 白500mg／L+10％香蕉提取液为最佳，45天生根率达92％。 关键词：铁皮石斛；组织培养；激素；原球茎 中图分类号：Q942 文献标识码 ：A 文章编号：1671—5934(2006}03—0011一o4 铁皮石斛为多年生附生草本植物，是极其珍贵的中药材，由于长期采挖，使得野生铁皮石斛资源面 临枯竭 ，供应紧张；加上铁皮石斛繁殖系数低，远不能满足生产上的需要…1。为保护这一珍贵中药品种， 许多学者对铁皮石斛种子和茎尖培养技术进行了研究，但大多数试管苗增殖系数低、试管苗茎细小、细 弱、移栽成活率不高，影响了铁皮石斛试管苗快繁和大规模的工厂生产[ ]。本研究在前人研究的基础 上，以铁皮石斛为研究材料，系统地研究不同激素对石斛原球茎增殖、分化及试管苗壮苗、生根等影响， 为工厂化育苗提供技术支撑。 1 材料和方法 1．1 材料 选取在铁皮石斛试管苗培养过程中诱导的原球茎进行增殖和分化，原球茎呈小圆锥状，每一团原球 茎包含多个原球茎，原球茎顶端有鳞片状的叶原基突起，呈淡绿色、尚未分化出真叶；将 已分化出真叶 的丛生芽用于壮苗和诱导生根。 1．2 试验方法 以MS或 1／2MS为基本培养基，根据不同的培养 目的，添加不同浓度的激素、蔗糖和附加物等，调 节培养基pH值 5．8，光照培养室温度保持在 28℃左右，光照强度2000Ix，每天光照 12小时。 1．2．1 原球茎增殖的激素配比试验 选取相同条件下生长 良好的原球茎，切成 1．5cm直径的团块，分别接种到7种不同的培养基 (表 1)。 每种培养基接种5瓶，每瓶接种 3个原球茎团，35天后统计结果。 1．2．2 原球茎分化的激素配比试验 选取相同条件下生长良好的原球茎，切成 1．5cm直径的团块，分别接种到7种不同的培养基 (表2)。 每种培养基接种 5瓶，每瓶接种 3个原球茎团，45天后统计结果。 1+2．3 试管苗的壮苗和生根 选取株高为 1—2cm左右，具有 1—2片真叶的无根丛生苗，分别接种到不同的培养基中。每种培养 收稿 日期：2006—02—12 资金项目：惠州学院科研项目 (C203．0204)和惠州学院博士启动基金项目 (C502．0201) 作者简介：陈兆贵 (1973一)，男，广西蒙山人，惠州学院生命科学系副教授，主要从事遗传学的教学和研究工作。 维普资讯 · 12 · 惠州学院学报 (自然科学版) 2006年第26卷 基接种 5瓶，每瓶接种 5株小苗，45天后统计结果。 2 结果与分析 2．1 石斛原球茎的增殖 在石斛组织培养过程中，石斛原球茎增殖是一个十分关键的环节，通过诱导石斛产生原球茎，将所 得的原球茎进行分化形成丛生芽，再将丛生芽培养成小苗，从而达到快速繁殖的目的。影响石斛原球茎 增殖中一个关键因素是培养基中激素浓度的配比。为研究激素配比对石斛原球茎增殖的影响，以MS为基 本培养基，附加NAA、6一BA和KT等激素进行配比试验，结果表明：(1)6一BA或KT与NAA配合使用 有利于原球茎的增殖，原球茎生长状况 良好，原球茎簇生、较