南丹参的快速繁殖与多倍体诱导的分析.pdfVIP

摘要 南丹参与丹参相似，含有多种相同的药用成分，在药用上具有诱人的丌发利用 前景。本研究首先通过组织培养进行南丹参的繁殖技术体系的研究，从而达到快速 繁殖的目的，使得优良品种得已永续利用；同时利用秋水仙碱对南丹参进行化学诱 导，初步签定得到多倍体植抹。j!要结果如下： 在南丹参快速繁殖研究中：(1)采用南月参离体叶片(含叶柄、内茎)在Ms附加2．0 6BA+o．2 mg．L1 mg．一IAA的培养基上诱导丛生芽的频率最高．平均为93．33％， 每丛芽达20一30个。约20天后将丛生芽转入除去IAA的培养基继代繁殖，使芽丛 健壮生长，继代培养基最优组合为：MS+1．O mg．一6-BA。将生长健壮长约3cnl的 单芽剪下转入l／2MS+O．5 mg．L’ABll十2％蔗糖生根培养基，7天后丌始生根，生 根率达95％以上，移栽成活率90％一95％。(2)在Ms附加2．Omg．L6一BA+0．2 rag．L-2．4 一D培养基上，叶缘及叶柄上长出绿色或浅褐色愈伤组织，陔愈伤组织具有长期继代 能力和分化植株能力，转入不含2，4一D的培养基后正常分化丛生芽。 在南丹参多倍体诱导中：(I)在生根培养基中添加秋水仙碱处理再生植株，以40 5 mg．I，‘处理5d加倍率约ll％。(2)以1 mg．I。1秋水仙碱处理愈伤组织和预培养一． 周的叶片一周，变异率结果相近，但叶片处理所需时间较短，诱导效果最好，加倍 率可达33．33％。 在人工多倍体籍定中：(I)加倍植株外部形态发生变异，叶片肥厚宽大、茎杆 粗短、植株较二倍体矮，叶柄基部膨大，根较粗壮。(2)气孔及保卫细胞比二倍体 明显增大。(3)染色体数为8—64条不等，H部分多倍体为同源四倍体。(4)应用过 氧化物酶和酯酶同工酶技术比较分析表l{Jj，变异植株与未加倍株同工酶谱存在明显 差异。过氧化物酶谱多倍体比二倍体多出两条特征性酶带．酯酶酶谱中多倍体植株 比_-Z倍体植株多了一条酶带，另外单个酶带活性两者都有所变化：南丹参与丹参有 些酶带相同。 关键词：南丹参快速繁殖秋水仙碱多倍体诱导 fiu 旨 植物组织培养技术是以植物生理学为基础发展起来的一项植物繁殖新技术，它 起源于1902年，至今已发展成为现代生物技术的重要组成部分。它已广泛的应用于 农业、林业、园艺等方面，且已经取得巨大的成绩。中国野生药用植物资源非常丰 富，据统计在5000种以上，但大量采集和消耗必然会导致物种濒危，甚至灭绝。于 是，积极研究药用植物资源的再生技术，使有限的资源为人类永续利用迫在眉睫。 我国药用植物的组织培养研究开始于20世纪50年代…。1964年，罗士韦教授 等首先报道了人参组织培养获得的研究成果。1983年，全国第一届药用植物培养讨 论会召开，届时全国已有30多个单位，100余人从事药用植物的组织培养研究。自 此，我国药用植物的组培研究迅速发展。1986年，我国科学工作者编写的有关专著 《药用植物组织培养》问世一一到目前为止，我国的科技工作者在药用植物组织培 养方面已取得了巨大的成绩，组织培养技术水平也在不断进步。 应用植物组织培养生产药用植物，可以不受地区、季节与气候限制，生产大量 的优良无性系，便于工厂化生产：还可获得单倍体、三倍体及其他多倍体、非整倍 体；组织培养的植物细胞也成为细胞水平上分析研究的理想材料，组织培养中的细 胞生长速度要比植物正常生长速度快，接近于分生组织的生长速度，并可获得人类 需要的多种代谢物质，或则利用组织培养或细胞培养手段直接生产药物；细胞融合 可打破种属间的界限，克服远缘杂交不亲和性障碍，在植物新品种的培育和种性的 改良中有着巨大的潜力。 南丹参(SaIvia bowlevnnn)为唇形科鼠尾草属多年生草本植物，含有多种活 性物质，其中有效成分主要为丹参酮I、丹参酮II．和隐丹参酮等二萜醌类化合物， 中