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农杆菌介导的小番茄子叶转化体系的建立及培育转基因高效吸铵植物的初步分析
垒!!堕坌兰竺:!:鱼堑三!堑!!堡墨竺壅圭坠兰童堡垒璺童兰堡竺垫塑塑兰!兰竺查—————————!!兰
摘要
营养物质从环境中向植物根系转运的过程是植物吸收养分的基础,揭示植物摄入
养分的分子机制对于增强作物对土壤微养分的吸收效率及提高作物对环境养分胁迫
的耐受力均有十分重要的意义。
本课题致力于通过在模式植物拟南芥菜和小番茄中过表达高亲和铵转运因子基
因来进一步评价铵转运因子在植物氮吸收过程中发挥的重要作用。我们预计人为改善
、
。
植物氮跨膜转运能力可能将会通过以下两个方面帮助作物提高吸氮效率:1.增强氮素
跨膜吸收效率;2.改善根的结构和发育特性。因此本课题的研究将为最终通过利用基
因工程手段改善植物氮跨膜转运能力来培育高效吸氮农作物提供必要的可行性分析。
根据GenBank报道的核酸序列信息设计特异性引物,通过PCR方法,我们从拟
南芥菜核基因组DNA中分别克隆到了拟南芥菜高亲和铵转运因子基因一一
及拟南芥菜根系特异性表达基因——,4炉只P3基因的启动子区。我们将AtAMTlj』基
因分另0与植物组成型表达CaMV35S-启动子或根系特异性表达4撇P3启动子融合,
构建到双元载体质粒中,并将这两个构建质粒分别导入到农杆菌中。
我们以8天苗龄的小番茄子叶为外植体,建立了一套小番茄直接分化再生体系,
再生率可高达7C
o/o口/上,可作为小番茄转基因受体系统。在此基础上我们建立了农杆
菌介导的小番茄子叶转化体系,转化效率可达到lO%左右。
我们将含有爿叫—w”j,基因的两个构建质粒分别利用农杆菌介导的遗传转化方法
转化到模式植物拟南芥菜和小番茄中。对小番茄组培转化苗的PCR鉴定结果表明,
AtAMTl;1基因己经整合到这些组培转化苗的核基因组中。对拟南芥菜的转化也已得
到了一些具有潮霉素抗性的可能的转化植株。
农杆菌介导的遗传转化
垒堑苎坌±竺:!:堡苎三!竺些堡墨竺堡兰垒堡!!!墨璺童些竺竺垫竺!塑型竺竺生—————二竺坐!!!!!哩
ABSTRACT
to nutrient
that arefundamental
Itiswellknowntransportprocesses plant
nutrient be
of
mechanism
themolecular may
understanding transport
acquisition.So
in the andthe of
efficiency capability
micronutrient-uptaken
helpfulimproving
for
low-nutrientresistance
plants.
are to akindof with
Inthis dedicated crop high
stuay,we cultivatingtransgenic
forammonium acertain
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