方法4从全血中制备红细胞.pdfVIP

方法 6-4.从全血中制备红细胞 原理 红细胞由全血离心后移除上清血浆后获得。移除的血浆体积决定 了红细胞的压积。当红细胞保存在 CPDA-1 中，在贮存期内保持其最 大生存活力需要保存液与细胞有适当的比率。保存于 CPDA-1 的红细 胞压积等于或者小于 80%保证了在最多 35 天的贮存期内，红细胞代 谢有充足的葡萄糖。 材料 1. 新鲜采集的全血，采血方法遵照方法 6-3。将血液采集在有联袋 系统的血袋中。 2. 血浆分离器 3. 金属夹和手压式热合机 4. 器械（剪刀、止血钳） 5. 热合机（可选） 6. 低温离心机 7. 天平 程序 1. 如果不制备富含血小板的血浆，全血采用“重”离心，温度设定 为 4℃。重离心通常采用 5000×g 离心 5 分钟或 5000×g 离心 7 分钟就足够了（加上减速的时间）。每个实验室必须确定自己的参 数。如果要计算相对离心力（RCF）g,可以使用表 6-4-1的计算公 式。如果要制备富含血小板的血浆，全血采用“轻”离心，通常 采用 2000×g 离心3 分钟就足够了（加上减速的时间）。每个实验 室必须确定自己轻离心的参数。 2. 将已离心的血袋放置在压浆板上，松开弹簧，使压浆板接触血袋。 3. 用止血钳夹住主血袋和转移袋之间的导管；如果没有闭合器械， 就在管路上打个松散的反手结。 4. 如果有两个或两个以上的转移袋，用止血钳让血浆流入其中的一 个转移袋。打开主血袋的闭合处。天平可以称量分离出的血浆。 去除适量的血浆以达到要求的红细胞压积。也可以使用自动化的 分离器。 5. 当要求的上清血浆量进入转移袋后，再次使用止血钳。在两个位 置热合主血袋和转移袋之间的管路。 6. 检查主血袋和转移袋上的献血者号码是否一致，并在两个热合口 之间分离管路。 说明 1. 如果血液采集到单个血袋中，则按照如下内容修改步骤：在离心 之前，用无菌导管连接器将全血血袋连接上转移袋。将血袋放置 在压浆板上之后，用止血钳夹住无菌转移袋的导管，将转移袋的 套管无菌穿刺入血袋荚膜内，松开止血钳，然后按照上述方法继 续操作。但是由于血袋系统开放需要变更有效期。 2. 对 450mL 的全血来说，分离出 230～256g(225～250mL)的血浆， 将红细胞保存在抗凝保存液中红细胞压积通常在 70%～80%之间。 相应的，500mL全血，分离出 256～281g（250～275mL）的血浆， 将红细胞保存在抗凝保存液中红细胞压积通常在 70%～80%之间。 3. 如果使用添加液，可以在第 4 步的时候分离出更多的血浆。在分 离血浆之后，让添加液从转移袋中流入红细胞。这个步骤使红细 胞压积达到 55%～65%。要确保采用适当的标签和有效期。 方法 6-5.从全血中制备储存前去白细胞红细胞 原理 采用制备红细胞的常规原理和材料，除了红细胞经过特定的白细 胞滤器的过滤。在美国，所有许可的用于红细胞制品的去白细胞滤器 都会在一定程度上去除血小板。抗凝全血经过滤之后，只能制备少血 小板血浆（PPP）（去除白细胞）和红细胞。但是，食品药品管理局（FDA） 最近批准了一项不损失血小板的全血去除白细胞滤器。作为选择，红 细胞可以在添加液中过滤，这就为制备血小板、血浆和红细胞提供了 可能。没有去除白细胞的红细胞仍然要通过无菌连接器连接到去白滤 器后流入保存袋内来进行白细胞的去除。 程序 1. 在全血离心前，将抗凝全血倒过来悬挂使血液经重力作用经在线 过滤器流入转移袋中。接下来按照方法 6-4制备 RBC的步骤[加入 添加试剂（AS），参照说明3 所述的方法]. 2. 带有滤器的抗凝全血可以直接离心。离心后分离血浆。加入添加 液，加入添加液的红细胞按照上述程序 1 通过重力进行。 3. 采用红细胞制