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28 半枝莲黄酮类有效部位体内抗肿瘤实验研究
半枝蓮黄酮類有效部位體內抗腫瘤實驗研究 In vivo anti-tumor study on the active flavonoid fractions derived from Ban-zhi-lian 1 2 3 DOU Jin Ming, XING Han Wei, DING Ding Rong 竇錦明 荊漢衛 于定榮 (1濰坊市中醫院 ;2濰坊市藥檢所 ;3中國中醫科學院中藥研究所) [摘要] 目的探討半枝蓮黄酮類有效部位(HSB-FEP )體內抗腫瘤活性。方法 先製備半枝蓮(HSB-FEP ):以 S180 、U14 、EAC 、HepA實體瘤小鼠動物模型進行體內實驗,評價其不同劑量(200mg/kg 、50mg/kg )對各實體瘤 的生長抑制作用及對體重、抑瘤率、胸腺指數、脾臟指數等的影響。 結果 體內試驗表明,與模型組比較,高 劑量組(200mg/kg )能明顯抑制S180 、U14 、EAC 、HepA實體瘤生長,平均抑制率分別為33.87% 、39.89% 、37.60% 、 46.29%,腺腺、腺指數顯著升高。 結論 HSB-FEP在體內能抑制荷S180 、U14 、EAC 、HepA瘤小鼠實體瘤生長。 [關鍵詞] 半枝蓮;黃酮類;抗腫瘤; S180 ;U14 ;EAC ;HepA 半枝蓮(Herba Scutellariae Barbatae )為唇形科多年生草本植物半枝蓮(Scutellaria Barbata D. Do n)的乾燥全草,味辛,苦,性寒,能清熱解毒、化瘀利尿。用於疔瘡腫毒,咽喉腫痛,跌撲傷痛,水腫,黃 [1] [2, 3] 疸,蛇蟲咬傷 。有研究資料表明,半枝蓮具有抗氧化、抗腫瘤等活性 ,臨床多用於對肝癌、鼻咽癌、宮 頸癌等疾病的治療。本實驗以半枝蓮HSB-FEP對腫瘤細胞株增殖抑制作用進行研究,具有一定的科研意義。 1 材料 1.1 藥材 半枝蓮Herba Scutellariae Barbatae購於濰坊海王中藥飲片有限公司(批號),經濰坊市藥檢 所鑒定質量符合要求。 1.2 實驗動物和瘤株 昆明種小鼠,雄性,體重(20±2 )g,由山東中醫藥大學實驗動物中心提供。S180 、U14 、EAC 、HepA瘤株, 由山東省醫學科學院藥物所腫瘤室提供。 1.3 儀器和試劑 BHC-13000llA2超淨工作台(蘇州蘇潔淨化設備有限公司);FA1204B型電子天平(上海精密科學儀器有限 公司);環磷酰胺(CTX批號江蘇恆瑞醫藥股份有限公司)。 2 方法 2.1 半枝蓮HSB-FEP的製備[4] 取半枝蓮乾燥全草10kg,粗碎,80%乙醇回流提取3次,200目藥篩過濾,合併濾液,減壓濃縮至2.0g.Ml-1 。 選用聚酰胺柱,用水洗脫,20%乙醇洗脫,70%乙醇洗脫,收集70%乙醇洗脫液,濃縮,乾燥即得 HSB-FEP,4℃ 保存備用。 2.2 對小鼠移植性腫瘤的實驗研究 2.2.1 S180 、U14 、EAC 、HepA荷瘤小鼠模型建立[5] 7 分別取傳代7天S180 、U14 、EAC 、HepA瘤源小鼠,抽取無菌腹水(活細胞數大於95% ),稀釋成2×10 /mL細 胞懸液,右前腋皮下接種0.2mL懸液,造S180 、U14 、EAC 、HepA實體型瘤模型。 2.2.2 實驗動物分組及合藥 分別取S180 、U14 、EAC 、HepA荷瘤小鼠各40隻荷瘤小鼠,稱重,隨機分為4組,每組10隻,即:模型組(ig 等體積水)、CTX組(ip 20mg/kg,隔天合藥)、高劑量組(ig 200mg/kg)、低劑量組(ig 50mg/kg),每日1 次,連續給藥10d 。末次合藥後處死動物,剝離瘤塊,用濾紙吸淨液體,稱瘤塊重,計算抑瘤率。同時分離胸腺 和脾臟,精密稱重,計算胸腺指數、脾臟指數,計算公式: 抑瘤率(% )= (模型組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/模型組平均瘤重×100% 臟器指數(mg/g )=臟器重量(mg )/體重(g )
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