高效液相色谱-串联质谱法检测动物源性食品中11种合成类固醇类激素 .pdfVIP

Application Note: CM0004 高效液相色谱-串联质谱法检测 动物源性食品中11种合成类固醇类激素多残留 刘 飞 赛默飞世尔科技（上海）公司色谱质谱部 关键词：TSQ Quantum, 合成类固醇类激素（anabolic steroids）, LC/MS/MS 合成类固醇类激素具有促进蛋白质合成的作用，雄性化作用是其主要特点。雄激素（俗称 “合成类固醇”）及其相关物质是历史最悠久、最重要的违禁药品之一，在畜牧业、体育 运动和保安业中一直被广泛的非法使用。早在二战时期即在德军中使用以提高战斗力。一 Key Words 些统计资料显示，在食品甾体类同化激素（anabolic steroids ,ASs）残留和体育运动兴奋剂 • TSQ Quantum • LC/MS/MS 监测中，雄性激素占阳性样品的60％以上。长期使用或摄入会干扰人体正常的激素平衡， • 合成类固醇类激素 男性出现睾丸萎缩、胸部扩大、早秃、肝、肾功能障碍或肝肿瘤。女性出现雄性化，月经 （anabolic steroids） 失调、肌肉增生、毛发增多等。 由于兴奋剂检测可轻而易举地查出运动员是否服用了苯丙胺,至20世纪70年代初,使用这类 药物的运动员已明显减少。取而代之的是50年代以来相继问世的多种合成类固醇，这类可 以使肌肉增大和力量增强的兴奋剂同时严重干扰体内激素平衡。因为一直未研究出准确而 可靠的检测方法，国际奥委会迟至1975年才宣布禁用合成类固醇。因此，对合成类固醇类 激素的检测不仅在体育运动中，而且在食品安全方面都有重要意义。 本文建立了猪、牛、羊及鸡肌肉和肝脏、牛奶和鲜蛋等动物源性食品中睾酮、甲基睾酮、 黄体酮、群勃龙、勃地龙、诺龙、美雄酮、司坦唑醇、丙酸诺龙、丙酸睾酮及苯丙酸诺龙 等11种合成类固醇类激素药物的液相色谱-串联质谱测定方法。 1. 实验部分 1.1 仪器与试剂 TSQ Quantum三重四极杆串联质谱仪（赛默飞世尔科技Thermo Fisher Scientific公司），配置 有电喷雾电离源（ESI）；Surveyor MS Pump液相色谱系统，包括Surveyor AS自动进样器。 标准品睾酮（Testosterone)、甲基睾酮（Methyl testosterone)、黄体酮（Progesterone）、群勃 龙（Trenbolone）、勃地龙（Boldenone）、诺龙（Nandrolone）、美雄酮（Methandienone）、 司坦唑醇（Stanozolol）、丙酸诺龙(Nandrolone propionate)、丙酸睾酮(Testosterone propionate)及苯丙酸诺龙（Nandrolone phenylpropionate）纯度均大于98 ％。用甲醇溶解并配 制成1.0 mg/mL标准储备液，再根据需要稀释成适当含量的混合标准工作液。其他试剂均 为HPLC色谱纯。 1.2 样品制备 1.2.1 取样 称取约500 g动物肌肉、肝脏，完全切碎后，匀浆备用；取10枚鲜蛋，去壳，均质备用；取 鲜牛奶500 mL，混匀备用 1.2.2 提取 试样5 g，置于50 mL离心管中，加入10