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禾谷镰孢菌茁-微管蛋白基因的克隆及在原核细胞中的表达
摇 南京农业大学学报摇 2011,34(1):51-56
摇 Journal of NanjingAgricultural University http:/ /
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张聪,徐建强,于俊杰,等.禾谷镰孢菌茁-微管蛋白基因的克隆及在原核细胞中的表达[J].南京农业大学学报,2011,34(1):51-56
禾谷镰孢菌 茁-微管蛋白基因的克隆及
在原核细胞中的表达
1 1,2 1 1 1 1*
张聪 ,徐建强 ,于俊杰 ,陈长军 ,王建新 ,周明国
(1.南京农业大学植物保护学院/ 农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室,江苏 南京210095;
2.河南科技大学林学院,河南 洛阳471003)
S
摘要:分别扩增了禾谷镰孢菌(Fusariumgraminearum)对多菌灵(MBC)敏感菌株(MBC )的茁 -微管蛋白基因(茁 -S)和茁 -
1 1 2
MR HR
微管蛋白基因(茁 -S),及多菌灵中抗菌株(MBC )和高抗菌株(MBC )的茁 -微管蛋白基因(茁 -MR 和茁 -HR),测序正
2 2 2 2
-1
确后连接到pET32a(+)原核表达载体上,转化至大肠杆菌Rosepta感受态中,经IPTG(1 mmol·L )诱导,得到了N末端融
3
合6伊His纯化标签的表达产物。 SDS鄄PAGE 电泳分析表明:在大肠杆菌中表达了相对分子质量约68伊10 的蛋白,和预测蛋
TM
白大小一致,表达的产物主要以包涵体的形式存在。 表达的蛋白经HisTrap HP Columns纯化并做了Western鄄blot验证,结
果表明,该蛋白能与抗His标签的单抗发生特异性反应。
关键词:禾谷镰孢菌;茁-微管蛋白基因;原核表达;纯化;Western鄄blot
中图分类号:S432郾1摇 摇 摇 摇 文献标志码:A摇 摇 摇 摇 文章编号:1000-2030(2011)01-0051-06
Cloning and prokaryotic expression of the 茁
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