二种多管水母光蛋白基因的分离、表达及生物活性初步研究 - 海洋学报.pdf

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2017-09-02 发布于天津
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二种多管水母光蛋白基因的分离、表达及生物活性初步研究 - 海洋学报.pdf

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二种多管水母光蛋白基因的分离、表达及生物活性初步研究 - 海洋学报

26 4 Vol. 26, No.4 2004 7 ACTA OCEANOLOGICA SINICA July 2004 1 1 1 1 1 1 1 罗文新 , 张军, 李少伟 , 程通 , 陈敏, 李少菁, 夏宁邵 ( 1. , 361005; 2 , 361005) : 分别从厦门东海域的大型多管水母细小多管水母中分离到了新的光蛋白基因aeqxm aeqxxm, 并在大肠杆菌中进行了表达. aeqxm aeqxxm DNA 序列的编码区总长均为5 5 bp, 无内含子序列, 推导的氨基酸序列总长均为195 个氨基酸. aeqxm, aeqxxm DNA AEVAQ440X cDNA 之间的核苷酸序列同源性分别为 07%, 51%, aeqxm aeqxxm DNA 的核苷酸序列同源性为 72% . 原光蛋白 apoaeqxm, apoaeqxxm 与 AEVAQ440X 编码的氨基酸序列之间的同源性分别为 47%, 42% , apoaeqxm apoaeqxxm 的氨基酸序列之间的同源性为944%. 分别将aeqxm aeqxxm 基因克隆至pTO- T7 表达载体, apoaeqxm, apoaeqxxm 在大肠杆菌中的表达量都达到40% 左右. 取菌体超声上清与腔肠动物荧光素f巯基乙醇混合再生后, 加入CaCl , 用荧光全谱仪检测到470 nm 处的瞬时发光, 表明表达的 2 apoaeqxm, apoaeqxxm 具有正常的生物学功能. : 大型多管水母; 细小多管水母; 光蛋白基因; 表达 + : Q959131 5 : A : 0253- 4 193( 2004) 04- 0110- 0 1 ( aequorin) , , 22 KD 2+ ( apoaequorin) ( coelenterazine) . 3 Ca coelen- 2+ terazine coelenteramide, CO . Ca 2 : 2001- 04- 16; : 2001- 0 - 13. : 63( 19- Q- 06) ; ( ; ( C0010001) . : ( 1970) , , , , . E - mail: nsx ia @ jingxian. xmu. edu. cn 4 : 111 Ca2+ , [ 1~ 4] , . [ 5~ ] , PCR, DNA . 19 5 Inouye [ 9, 10] cDNA AQ440( [ 11] AEVAQ440X) , Charbonneau , 1 9 2+ [ 12] , 3 EF hand Ca . Prasher cDNA, , Inouye cD- NA , 5