エピトープマッピング タクロリムス修饰と结合抗体测定 - clinical chemistry.pptVIP

要約 イムノゲン結合間の分離 2つの抗体にとって可能な2つの異なったエピトープを作　　製 サンドイッチアッセイを予測した交差反応 ELISAとACMIAはサンドイッチフォーメーションを確立した サンドイッチアッセイは、高い特異性を示した 薬物代謝産物と類似体での低い交差反応_________________________________________________ Reference: Werena Gounden and Steven J. Soldin. Tacrolimus Measurement: Building a Better Immunoassay. Clin Chem 2014; 60: 575 Thank you for participating in this month’s Clinical Chemistry Journal Club. Additional Journal Clubs are available at Download the free Clinical Chemistry app on iTunes for additional content! Follow us * ? Copyright 2009 by the American Association for Clinical Chemistry ? Copyright 2009 by the American Association for Clinical Chemistry ? Copyright 2009 by the American Association for Clinical Chemistry National Academy of Clinical Biochemistry Laboratory Medicine Practice Guidelines: Follow-Up Testing for Metabolic Disease Identified by Expanded Newborn Screening Using Tandem Mass Spectrometry D.J. Dietzen, P. Rinaldo, R.J. Whitley, W.J. Rhead, W.H. Hannon, U.C. Garg, S.F. Lo, and M.J. Bennett September 2009 /cgi/content/article/55/3/1234 ? Copyright 2010 by the American Association for Clinical Chemistry Journal Club ? Copyright 2009 by the American Association for Clinical Chemistry ? Copyright 2009 by the American Association for Clinical Chemistry 2つの抗タクロリムス抗体を使用するタクロリムスのサンドイッチアッセイ T.Q. Wei, Y.F. Zheng, M. Dubowy, and M. Sharma April 2014 /content/60/4/621.full ? Copyright 2014 by the American Association for Clinical Chemistry 序論 – なぜ、サンドイッチアッセイか? 競合免疫測定法 (IAs) は通常、タクロリムスの選択フォーマットである タクロリムスのためのサンドイッチ IAsは知られていない 理由:ハプテン薬物における、2つの抗体結合間の立体障害を避けることの難しさ 競合IAsを超えたサンドイッチの利点 分析感度が良い: 過剰な抗体 (Abs) 試薬デリバリーや温度変化に反応しにくい 特異性が良い: 代謝産物交差反応が低い 薬物アッセイにとっては重要 Figure 1. タクロリムス 2D (左) と 3D (右) 構造. タクロリムスは分子量804Daのハプテン薬物である. 14H04と1E2のイムノゲンは、各々、C22とC32位に結合された. C22とC32は、2D構造と3D構造に分けられている. 2つの結合間の10炭素隔離が、2つの抗体がタクロリムスの2つの異なったエピトープを認識させた. 序論: サンドイッチアッセイは可能か？ 1E2 Immunogen: Tacrolimus linked to KLH via C32 14H04 Immunogen: Ta