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·36· 微生物学通报 2006年33(3) 生物发光法微生物快速检测试剂的性质 及其影响因素研究水 张菊梅1’2’3吴清平h4 李程思1 吴慧清1 (广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广州510070)1 (中国科学院南海海洋研究所广州510301)2(中国科学院研究生院北京100049)3 摘要：研究了A11P生物发光微生物快速检测试剂的反应动力学、反应最适温度、pH以及 各种影响因素。在ATP生物发光反应中，测试系统中D一荧光素用量为40—50斗g／mL时对 反应已经足够；发光脉冲计数cPM值随反应时间的延长不断降低，开始的1min内，其 cPM值下降最快，然后下降速度不断减缓；反应的最适温度为24℃～25℃；而体系的最佳 pH为7．2～7．4。配制好的发光试剂溶液置于4℃保存45h，可以保持86％的活力，在25℃ 时保温1h，活力下降较少，随时间的增加，活力逐渐下降，到6．5b时，仅剩53．5％的活 力，而在33℃时，随着保温时间的延长，酶活力下降较快，保温1．5h，活力剩下59．1％， 因此保存温度对发光试剂活力的影响非常大。各种化学物质如酸、碱、盐及表面活性剂都 100及酸、碱对系统均有一定的影响，CTAB、SDS及TCA则严重抑制发光反应。 关键词：生物发光，微生物，快速检测试剂，性质，影响因素 中图分类号：Q93—332文献标识码：A · Facto璐of Cha豫cteristi璐粕d砌鹏ntial Stlldy叫the Micmbial＆咿讯 Biolmni玳鼬ence‘ Detecti蚰R翰gentby zHANG wu u wu Ju．Meil·2·3 Qing—Pin91一cheng—silHui—Qin91 (G眦，l础ngm以，lc矧J己可如60r甜D叮矿岛胁鹏批动帆8以Appf妇如n， ‰，lg幽ng胁l讧抛。厂胁hD6如lc0影，G∽，lgz幻“510070)1 510301)2 (so赫饥i，In池胁￡缸吮妒Dceon0如盯，Ac诎m玩si，‘池，G∞，lg抽ou (Grn也吮№沁rs咖0，劬i，ⅫeAcD幽掣矿S啦n∞，莎昭100049)3 Ah出瑚ct：In reaction andvariousiIlfluentialf如岫ofATP tIlis船say，thekinetics，叩timumtempemture，pH tllat rnicmbialdetection biolulllinescenceweIestudied．Thereslll协showedit’ieIIou曲f矗de眦一 mpid reagentby tion tohave D—hlc彘rin．ne decr嘣捌缸tes“nthefi喊IIlinuteof嘲c— system 40～50斗g／mL li曲tpmduction the to re们tion w聃24℃一25℃and tion，tllenbegandecaysIowIy．％e叩t