中量大量细菌基因组DNA提取试剂盒.PDFVIP

中量/大量细菌基因组DNA 提取试剂盒 Cat. No: DN12 南京钟鼎生物技术有限公司 南京市玄武区孝陵卫双拜巷78 号紫金山创业园A 座 联系电话： 400-025-1124 传 真： 025 电子邮件： order@ 网 址： 适用范围： 适用于快速提取各种细菌基因组DNA 。 产品规格 产品货号 规格 DN12-20T 20 次 DN12-50T 50 次 试剂盒组成、储存、稳定性： 本试剂盒可在室温储存 12 个月 试剂盒组成 保存 20 次 50 次 细胞核裂解液 室温 90 ml×2 250 ml×2 蛋白沉淀液 室温 60 ml 150 ml DNA 溶解液 室温 10 ml 20 ml RNase A(10mg/ml) -20℃ 500 ul 1 ml 产品简介： 本试剂盒用于快速的从各种细菌中提取基因组 DNA 。细菌样品加入细胞核裂解液(或者 通过溶菌酶或者其它一些酶帮助裂解细胞壁后) ，首先在强去污剂作用下裂解细胞释放出基 因组 DNA，接着加入 RNase A 去除 RNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯 净的基因组 DNA 通过异丙醇沉淀并重溶解于 DNA 溶解液。 产品特点 1. 不需要使用苯酚等有毒试剂。 2. 快速，简捷，单个样品操作一般可在 30 分钟内完成。 3. 结果稳定，产量高，OD260/OD280 典型的比值达 1.7～1.9，长度可达 50 kb - 150kb， 可直接用于构建文库，PCR，Southern-blot 和各种酶切反应。 储存事项： 1. 环境温度低时细胞核裂解液中某些去污剂成份会析出出现浑浊或者沉淀，可在 37℃水 浴加热几分钟，轻轻旋摇，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。 2. 蛋白沉淀液可能出现析出和沉淀，可以在 37℃水浴几分钟帮助重新溶解，如果不能完 全溶解，也不影响使用效果，直接取用上层溶液即可。 3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化，各溶液使用后应及时盖紧 盖子。 注意事项： 1．所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到 13,000xg，可容纳50ml 离心管的传 统台式离心机。 2 ．开始实验前根据需要将水浴先预热好备用。 3 ．本试剂盒为溶液型，可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的细菌细胞量，请联 系我们索取其它处理量的操作手册。 操作步骤：（请先阅读注意事项再开始实验） 提示： 实验需自备试剂：异丙醇、70 ％乙醇、0.5M EDTA 和Lysozyme （溶菌酶）(用于革兰氏 阳性菌) 、lysostaphin(用于某些难裂解的革兰氏阳性菌) 、水浴箱。。 1. 收集 10 毫升过夜培养细菌加入 15 毫升离心管。 2. 2,000xg 离心 3 分钟，使细胞沉淀下来，弃上清，涡旋或轻弹打散细胞沉淀。对革兰氏 阳性菌，接步骤 3 。对革兰氏阴性菌，直接接步骤 6 。 3. 加入 4.8ml 50mM EDTA （pH8.0）完全重悬细胞。 4. 加入 1.2ml 溶菌酶 (20mg/ml) ，混匀。 对于大部分的革兰氏阳性菌如 Bacillus subtilis ，Micrococcus luteus，Arthrobacter luteus ， Nocardia o