邻苯二甲酸为背景吸收电解质的毛细管电泳法测定低分子量肝素 - 色谱.PDF

２０１７年１月 Ｖｏｌ．３５ Ｎｏ．１ Ｊａｎｕａｒｙ ２０１７ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ５９～６４ 邹汉法研究员纪念专辑（下） ·研究论文 ＤＯＩ：１０．３７２４／ ＳＰ．Ｊ．１１２３．２０１６．０８０３４ 邻苯二甲酸为背景吸收电解质的毛细管电泳法 测定低分子量肝素中的阴离子 张明瑜，　 康经武∗ （生命有机化学国家重点实验室，中国科学院上海有机化学研究所，上海 ２０００３２） 摘要：在生产和贮存低分子量肝素的过程中，糖链上的硫酸酯基团会被水解而损失活性，因此肝素样品中常可以检 测到游离的硫酸根离子，此外在生产过程中还会引入其他阴离子。 为了检测低分子量肝素的质量稳定性，常用离 子色谱检测低分子量肝素中游离的阴离子。 但是相对分子质量较大的低分子量肝素会污染离子色谱柱和抑制器。 ２－ － － ３－ － 为此发展了一种灵敏的毛细管电泳方法用于测定低分子量肝素中游离的ＳＯ 、Ｃｌ 、Ｆ 、ＰＯ 和ＯＡｃ 。 不同于常 ４ ４ 用的背景吸收离子铬酸根，采用邻苯二甲酸根作为背景吸收电解质。 与铬酸根相比，邻苯二甲酸根与所有待测阴 离子电泳淌度匹配得更好，因此可以获得较窄的峰形。 而且邻苯二甲酸根在２３０ ｎｍ检测波长下的摩尔吸光系数 （４７５４ Ｌ／ （ｍｏｌ ·ｃｍ））比铬酸根（２５４ ｎｍ，２４００ Ｌ／ （ｍｏｌ ·ｃｍ））高。 因此，可以将毛细管电泳检测阴离子的灵敏 度提高到与离子色谱法相当的水平。 通过验证，该方法在０００２～１ｍｍｏｌ／ Ｌ 的浓度范围内具有较好的线性关系， ＝ ＝ ＝ 日内（ｎ ６）和日间（ｎ ３）迁移时间和峰面积的相对标准偏差均小于３％。 所测阴离子的检出限（Ｓ／ Ｎ ３）和定量 ＝ 限（Ｓ／ Ｎ １０）分别为０４～０８ μｍｏｌ／ Ｌ和２～４ μｍｏｌ／ Ｌ。 该方法可用于监测低分子量肝素的稳定性。 关键词：毛细管电泳；阴离子分析；低分子量肝素；稳定性监测 中图分类号：Ｏ６５８　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１０００⁃８７１３（２０１７）０１⁃００５９⁃０６ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｉｏｎｓ ｉｎ ｌｏｗ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ ｈｅｐａｒｉｎ ｂｙ ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓｗｉｔｈ ｐｈｔｈａｌａｔｅ ａｓ ｔｈｅ ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ ｅｌｅｃｔｒｏｌｙｔｅ ＺＨＡＮＧ Ｍｉｎｇｙｕ，ＫＡＮＧＪｉｎｇｗｕ∗ （ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＳｈａｎｇｈａｉＩｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００３２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｓｕｌｆａｔｅ ｅｓｔｅｒ ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ ｌｏｗ ｍｏ