英国物理学家Robert Hooke用自制的显微镜首次发现了细胞.PPT

* * 多孔微载体培养优点 细胞在网状结构的小孔内部生长，可降低血清用量 过程简单，增加细胞固定化稳定性 大的比表面积保证细胞充分的生长空间 细胞生长在载体内部，能使细胞免受机械损 提高搅拌强度和通气量，强化传质 微囊化培养优点 微囊内的细胞可获得保护，避免了剪切力的损害 可以获得较高的细胞密度 当控制微囊膜的孔径后，可使产品浓缩在微囊内，从而有利于下游产物的纯化 可采用多种生物反应器进行大规模培养，如搅拌罐式生物反应器、气升式反应器等 动物细胞培养的操作方式 分批式操作（batch） 流加式操作（fed-batch） 半连续式操作（semi-continuous） 连续式操作（continuous） 灌流式操作（perfusion） 分批式操作 操作简单 直观的反应细胞生长代谢的过程 可直接放大 半连续式操作 培养物的体积逐步增加 可进行多次收获 细胞可持续指数生长，并可保持产物和细胞在较高的浓度水平，培养过程可延续到很长时间 灌流式操作 细胞罐流系统可使细胞或酶保留在反应器内，维持较高的细胞密度，一般可达107～109/ml，从而较大的提高了产品的产量 连续灌流系统，使细胞稳定的处在较好的的营养环境中，有害代谢废物浓度积累较低 反应速率容易控制，培养周期较长，可提高生产率，目标产品回收率高 产品在罐内停留时间短，可及时回收到低温下保存，有利于保持产品的活性 第六节 动物细胞生物反应器 理想的动物细胞生物反应器具备的基本条件 制造生物反应器所采用的一切材料无毒性 生物反应器的结构具有良好的传质、传热和混合的性能 密封性能良好，可避免一切外来微生物的污染 对培养环境中多种物理化学参数能自动检测和调节控制，控制的精确度高，而且能保持环境质量的均一 可长期连续运转 容器加工制造时要求内面光滑，无死角，以减少细胞或微生物的沉积 拆装、连接和清洁方便，能耐高压蒸汽消毒，便于操作维修 设备成本尽可能低 动物细胞培养生物反应器的类型及其特点 搅拌罐式生物反应器 气升式生物反应器 中空纤维式生物反应器 透析袋或膜式生物反应器 固定床或流化式生物反应器 培养过程中需检测的物化参数 主要参数的检测和控制方法 动物细胞生物反应器的检测控制系统 动物细胞培养生物反应器大规模培养的应用 病毒疫苗 非抗体免疫调节剂 多肽生长因子 酶类 激素 肿瘤特异性抗原 单克隆抗体 病毒杀虫剂 第七节 细胞工程在传统制药 工业中的应用 提高代谢产物的产量 改变抗生素的组分 产生新化合物 第八节 动物细胞制药的前景与展望 提高质量，降低成本和改进质量方面的研究 转基因动物的研究 组织工程的研究 * * * * * * * * * * * * * * * * * 体外培养细胞一代生存期 细胞传代数（passage number）从细胞接种到分离再培养时的次数 细胞倍增代数（generation number）表示细胞分裂的次数 细胞转代经历的阶段 游离期（悬浮期） 贴壁期 潜伏期 对数生长期 停滞期（平顶期） 细胞转代经历的阶段 游离期（悬浮期） 贴壁期 潜伏期 对数生长期 停滞期（平顶期） 第四节 动物细胞的培养条件和培养基 基本条件 所有的与细胞接触的设备、器材和溶液，都必须保持绝对无菌，避免细胞外微生物的污染 必须有足够的营养供应，绝对不可有有害的物质，避免即使是极微量的有害离子的掺入 保证有适量的氧气供应 需随时清除细胞代谢中产生的有害产物 有良好的适于生存的外界环境，包括pH、渗透压和离子浓度等 及时传代，保持合适的细胞密度 细胞培养的无菌环境 水质 pH 渗透压 温度 空气 营养 无菌室 超净工作台 蒸馏器 超纯水器 抽气泵 高压蒸汽锅 电热恒温干燥箱 CO2培养箱 水浴箱 液氮生物容器 倒置显微镜 离心机 不锈钢微孔滤膜单层滤器 一次性滤器 全自动微量血球计数仪 超声波洗涤机 血球计数板 细胞污染 念珠菌污染 丝状菌污染 培养基 天然培养基  合成培养基  无血清培养基 血清的分类 小牛血清 新生牛血清 胎牛血清 血清的作用机制 提供基本营养物质 提供有利于细胞增殖所需的各种生长因子和激素 提供有利于细胞贴壁所需的贴附因子和伸展因子 提供可识别金属、激素、维生素和脂类的结合蛋白 提供细胞生长所必需的脂肪酸和微量元素 合成培养基 种类：MEM、DMEM、IMDM、 RPMI1640、 199、109培养基、HamF12等 基本组分：氨基酸、维生素、糖类、无机盐等 优点：维持细胞体外长期生存，成分已知，便于 控制实验条件，培养基种类很多，可根据