UrinEasy 尿液细胞扩增培养试剂盒 - 赛贝生物.PDF

http://www. UrinEasy 尿液细胞扩增培养试剂盒 V3.3 版本，更新日期：2016 年10 月28 日 货号：CA3103200 规格：1 Kit 储存条件：UrinEasy 尿液细胞扩增培养基础培养基2 ~ 8℃，UrinEasy 尿液细胞扩增培养添加剂-20 ℃，混匀 后2 ~ 8℃，1 个月内使用完毕。 产品简介： UrinEasy 尿液细胞扩增培养试剂盒是由赛贝生物（Cellapy® ）开发出的一种用于尿液细胞稳定扩增的试 剂盒。本试剂盒操作简单易行，可使分离的肾上皮细胞，快速增殖，保持自我更新能力。短时间内收获大量 细胞，用于科研或其他应用。 产品内容： 组分代码 名称 规格 数量 CA3103200-1 UrinEasy 尿液细胞扩增培养基础培养基 200mL 1 瓶 CA3103200-2 UrinEasy 尿液细胞培养扩增添加剂 20mL 1 支 需要材料：  UrinEasy尿液细胞扩增培养试剂盒（Cellapy：CA3103200 ）  细胞培养级PBS溶液（Hyclone ：Cat. no. SH30256.01）  0.25%胰蛋白酶（Gibco ：Cat. no.）  细胞培养级DMSO （Sigma：Cat. no. D2650 ）  15mL锥形底离心管（Corning ：430791 ） 培养材料准备：  UrinEasy尿液细胞扩增培养完全培养基（以下简称：UrinEasy扩增完全培养基）：在2 ~ 8℃解冻 UrinEasy尿液细胞扩增培养添加剂，吹打混匀，随后将添加剂加入UrinEasy基础培养基形成 UrinEasy扩增完全培养基（每0.5mL添加剂与5mL基础培养基混合）。UrinEasy扩增完全培养基可 在2 ~ 8 ℃稳定储存1个月。 注：添加剂在2 ~ 8 ℃解冻，按实际用量对添加剂进行分装，分装后重置于-20 ℃保存，避免反复冻融。 尿液细胞的扩增和传代： 1. 用UrinEasy 分离试剂盒得到的肾上皮细胞贴壁后，每2 天用3mL 新鲜UrinEasy 扩增完全培养基换 1 北京赛贝生物技术有限公司 地址：北京市昌平区生命科学园创新大厦 D 座 202 室 电话：010 邮箱：support@ http://www. 液，当细胞增殖密集时，即可传代扩增。 2. 将UrinEasy 扩增完全培养基取出并平衡至室温，准备PBS 溶液和0.25%胰蛋白酶。 3. 吸走UrinEasy 扩增完全培养基，并加入PBS 溶液洗一次。 4. 加入0.25%胰蛋白酶使之完全覆盖皿底，37℃恒温CO2 培养箱中消化1 ~ 3min。 5. 加入等量UrinEasy 扩增完全培养基，终止消化，吹打皿底使细胞脱落。 6. 将细胞悬液转移至新的15mL 离心管内，并用新鲜UrinEasy 扩增完全培养基清洗皿底收集剩余细胞。 7. 200g 离心3min 。 8. 完全弃除上清，用新鲜的UrinEasy 扩增完全培养基重悬细胞，并接种到新的培养皿中。 9. 置于5% CO2 的37℃恒温细胞培养箱中培养，每2 天用3mL 新鲜完全培养基换液，当细胞汇合度 达到90% 以上时，传代扩增。 尿液细胞的冻存： 1. 配制尿液细胞冻存液：90% UrinEasy 扩增完全培养基+10% DMSO ，置于2 ~ 8 ℃备用，室温平衡PBS 溶液和0.25%胰蛋白酶