山楂叶总黄酮提取物质量标准及化学成分分析.pdfVIP

中文摘要 皮素、芦丁、金丝桃贰、牡荆素等多种化学成份，其中棚 皮素及其试类是山植叶的主要成份，也是其在心血管系统 疗效的有效成份之一。因此，本文建立了以棚皮素为对照 品，用高效液相色谱法测定山植叶总黄酮提取物中棚皮素 含量的方法。 目的:建立山植叶总黄酮提取物的质量标准 方法和结果:以棚皮素为对照品，在高效液相色谱仪 上筛选测定山植叶总黄酮提取物中棚皮素含量的最佳色 谱条件，并进行系统适用性试验和方法学考察。在此基础 上，对 5批山植叶总黄酮提取物中棚皮素的含量进行测 定。 色谱条件:色谱柱为DiscoveryC18(250*4.6mm)， 流动相为甲醇(40%)-0.4%磷酸水((60%)~甲醇(60%)-0.4% 磷酸水(40%)在 75分钟内作线性梯度洗脱，流速为 0.6ml/min，柱温为30士10C，检测波长为256nm4 色谱系统适用性试验:理论塔板数 (N)按棚皮素计 为28681，保留时间(tg)为50分钟，拖尾因子为1.0080 线性回归方程的建立:称取棚皮素标准品4mg，精密 称定，用甲醇配成不同浓度的标准溶液，依色谱条件进行 分离，测得各自峰面积，以峰面积对相应重量作图， Y=186848150X-422161.40,r=0.9994(n=5)，线性范围为 0.084-0.42ugo 精密度试验:吸取标准溶液 loul，进样。依色谱条 件进行分离，RSD值为1.84%(n=5)Q 样品提取方法的研究:(1)提取方法:取山植叶总黄 酮提取物40mg，分别精密称取3份，第1份放入loml容 中文摘要 量瓶中直接加入甲醇溶解并稀释至刻度，超声提取10分 钟。第2份加入甲醇-25%盐酸 ((4:1)溶液35ml溶解， 于水浴上水解40分钟，挥去溶剂，再用甲醇定溶于loml 容量瓶中，超声提取l0分钟。第3份照第2份同法水解 后挥干溶剂，用乙酸乙Aml萃取，挥去乙酸乙酷后加入甲醇 溶解并定溶于loml容量瓶中，超声提取10分钟。结果表 明用甲醇直接溶解的样品分离效果不理想，水解样品及水 解后用乙酸乙酷萃取的样品在此HPLC条件下分离效果较 好。(2)水解时间:考察了30分钟、40分钟、60分钟， 结果表明40分钟时水解基本完全。所以水解时间定为40 分钟。(3)甲醇-25%盐酸 ((4:1)水解溶液量:考察了 25ml,35m1,50m1，结果表明水解溶液量对含量测定几乎 没有影响。故选定水解溶液量为35m1. 回收率试验:精密称取一定量棚皮素对照品，分别加 入到高中低三个不同量的山碴叶总黄酮提取物细粉中，按 样品制备方法操作，测定加样回收率。平均回收率为 100.69%RSD值分别为2.37%,0.80%,0.42%(n=3). 重现性试验:平行5份样品，依 “样品测定”项，进 行样品测定，RSD为2.39%(n=5). 样品制备及测定:取山植叶总黄酮提取物40mg，精 密称定，放于三角瓶中，加入甲醇一25%盐酸(4:1)溶液 35ml溶解，于水浴上水解40分钟，挥去溶剂，再用甲醇 溶解并定溶于loml容量瓶中。超声提取10分钟，高速离 心，取上清液，进样loul，依色谱条件进行分离，测定。 对不同批次的山植叶总黄酮提取物共5批，依测定方法进 行样品处理及测定。结果，最高含量为5.67ug/mg，最低 中文摘要 含量为5.32ug/mg，平均含量为5.56ug/mg4 结论:1.山碴叶提取物以总黄酮为有效成份，其化学 成份复杂，且贰与贰元并存，内在质量难以控制，本文首 次建立了用高效液相色谱法测定山碴叶总黄酮提取物中 棚皮素含量的方法，该方法操作简便，结果准确，重现性 好。 2.用高效液相色谱法测定 5批山碴叶总黄酮提取物 中棚皮素含量，通过计算，其平均值为5.56ug/mga 第二部分 山植叶提取物总黄酮含量的测定 山楼叶提取物以总黄酮为有效成份，对其总黄酮含量 进行测定，在增强其疗效及提高内在质量方面，都是必不 可少的。 目的:建立山碴叶提取物的质量标准 方法和结果:以芦丁为对照品，采用经典的染色比色 方法，照紫外分光光度法测定并进行方法学考察。在此基 础上