I型胶原蛋冻干粉产品说明书1 - 天津卫凯生物工程有限公司.DOC

/ 地址: 天津市经济技术开发区洞庭路220号 天津国际生物医药联合研究院16楼 电话：+86-2265378919 传真：+86-22E-mail: info@ I型鼠尾胶原说明书 Collagen Type I From Rat Tail Tendon 产品说明：天津卫凯生物工程有限公司生产的I型鼠尾胶原（Collagen Type I From Rat Tail Tendon）是借鉴Navneeta Rajan, Jason Habermehl法[1]，经过乙酸抽提、离心、灭菌、透析等步骤制备得到的高纯度、高活性胶原蛋白，可用于包被细胞培养器皿（单分子层包被），适合多种细胞培养，产品为冻干粉。 产品信息： 货号及产品规格 备注 MAT1015-7.5mg 可溶于0.02M乙酸，无菌干粉，现货 MAT1015-10 mg 可溶于0.02M乙酸，无菌干粉，现货 产品特点： 产品种类：生物制品 产品剂型：干粉 纯度：90%以上电泳纯 溶解性：溶于0.02M 乙酸：如配置5.0 mg/mL溶液方法：称5mg溶解于1mL 4℃的0.02M 乙酸，轻轻搅拌十几分钟，尽量避免气泡产生，4℃静置一段时间，交替进行搅拌、静置，直到溶解为止，大概5小时左右即可得到透明液体，建议：用之前提前一天配置，过夜即可） 适用性：适用于细胞培养 保存温度：-20℃ 保质期：12-18个月 适用范围： 细胞的贴壁培养 适合多种类型细胞的贴壁如肝脏细胞、神经节细胞、胚胎细胞、肌细胞、肺细胞、神经鞘细胞等。 细胞培养器皿的包被 可用于包被细胞培养器皿，建议包被浓度为0.025-0.05mg/ml 。 不同细胞、不同操作条件下最适包被浓度会有不同，建议使用前摸索一下适合供试细胞的包被浓度。 具体包被方法如下：整个包被过程均在冰上操作，以24孔板包被为例 将胶原蛋白产品（5mg/ml）溶液置于冰上备用； 取15ml的离心管置于冰上，加入预冷的基础培养基，如：DMEM 10ml； 取100ul的胶原蛋白产品（5mg/ml）加入到上述10ml的DMEM中，混匀； 此溶液配制浓度为0.05mg/ml； 将上述制备好的胶原溶液加到对应的孔板中，建议24孔板每孔加300 μL； 将培养板置于超净台上，轻柔晃动，使胶原溶液覆盖整个孔的底面静置。 将孔板放于培养箱中，放置过夜； 取出培养板，去除上清，每孔加500 μL基础培养基清洗两次，开盖自然晾干（或过夜干燥）。 封口膜包装好，4℃保存。 使用时，取出已经包被好的培养板，每孔加500 μL细胞完全培养基，置于CO2培养箱中平衡15 min； 吸弃培养基，加入一定量细胞悬液，置于培养箱中贴壁培养，定时观察贴壁情况。 安全性 做好安全保护措施，戴口罩、手套操作 参考文献 [1] Navneeta Rajan1, Jason Habermehl1, Marie-France Cote′et al. Nature Protocals. 2006,6(1): 2753. 附图 贴壁细胞 肝脏原代细胞未贴壁和贴壁培养比较 SDS电泳 贴壁细胞