201503 荧光分光光度法测定面粉中核黄素-王丛笑pdf.pdfVIP

一、实验目的 荧光分光光度法测定 荧光分光光度法测定 荧光分光光度法测定 二、实验原理 面粉中核黄素 （ ） 面粉中核黄素 VB （ ） VB 面粉中核黄素 （ ） VB2 2 2 三、FL-4500型气相色谱仪 复旦化学系 四、实验步骤 教学实验中心 五、数据处理 王丛笑 六、思考题 15:41:01 一、实验目的 一、实验目的 一、实验目的 1、掌握面粉样品的消化方法，了解溶液的pH值等对核 黄素荧光强度的影响。 2、了解荧光分光光度计的主要结构及工作原理，掌握 其正确使用方法。 3、荧光分析法基本原理和学习测绘核黄素的激发光谱 和荧光光谱，标准曲线法定量分析。 15:41:01 二、实验原理 二、实验原理 二、实验原理 1、荧光、荧光分子/ 荧光物质 2 、荧光分析法：特点、定量方法 3 、核黄素VB2 ：结构、性质、面粉中提取方法 4 、荧光分光光度计：结构、原理、操作 15:41:01 问题1. 荧光、荧光分子 问题1. 荧光、荧光分子 问题1. 荧光、荧光分子 荧光产生的机制——去活化过程 15:41:01 强荧光物质 强荧光物质 强荧光物质 结构特点：π→π﹡、共轭π体系、刚性平面结构、取代基 如荧光素和酚酞结构十分相似， 荧光素在溶液中有很强的荧光， 而酚酞没有。 如芴和联苯在相同的条件下，荧 光量子产率约为1和0.18 15:41:01 影响荧光发射溶液环境因素 p.362 ： （a ）溶剂效应：取决于荧光体和溶剂的化学结构、极 性、重原子效应 （b ）温度：T ↑φ ↓ （c ）pH f 平衡解离关系 对λf.max 、φ 均有影响 f 溶液荧光的猝灭 p.364 荧光物质分子与溶剂分子或溶质分子之间相互作用而导致荧光强度 下降的现象称为荧光的猝灭 （或熄灭 ） 引起荧光猝灭的物质称为荧光猝灭剂。 15:41:01 问题2. 分子荧光分析法 问题2. 分子荧光分析法 问题2. 分子荧光分析法 15:41:01