类泛素蛋白j61lm共价结合底物蛋白质的活性分析 - 复旦学报(医学版).pdfVIP

复旦学报医学版 类泛素蛋白 共价结合底物蛋白质的活性分析 于 欣 王英明 吴燕华 金成学 穆 颖 乔守怡 复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室 上海 金日成大学平壤医学院基础医学部 平壤 摘要 目的 探讨类泛素蛋白 的 末端双甘氨酸基团及双泛素结构域结合修饰底物蛋白质的活性 方法 分别将野生型全长 末端双甘氨酸的缺失突变体 分别包含 端 端泛素结构域 的截断突变体 和 构建到真核表达载体中转染 细胞并使用 蛋白酶体抑制 剂 处理细胞利用 方法检测野生型 及其突变体结合底物蛋白质的活性结果 与野生型 的蛋白质底物结合能力相比 与底物蛋白质结合能力均显著 下降蛋白酶体抑制剂 能够促进 及其突变体的底物结合活性结论 的 末端双甘氨 酸基团及双泛素结构域都是 与底物共价结合所需的活性基团被 标记后的底物蛋白质通过 蛋白酶体途径降解 关键词 类泛素蛋白 泛素结构域 中图分类号 文献标志码