猪脑心肌炎病毒非结构蛋白eh的原核表达及生物信息 - 中国畜牧兽医.pdf

中国畜牧兽医 猪脑心肌炎病毒非结构蛋白 的原核表达及 生物信息学分析 罗亚坤梁 琳朱 禹王 静刘 琪刘 存崔尚金 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京 摘 要为获得猪脑心肌炎病毒 蛋白并进一步了解其结构本研究以 株的 为模 板通过 扩增 基因将其克隆至 载体经 双酶切和测序鉴定挑选测序正确的质粒经 双酶切获得目的片段并将其克隆至 载体以构建重组原核表达质粒将重组质粒转化至大肠杆菌 感受态细胞经 诱导后 检测目的蛋白表达情况 检测纯化后 蛋白及 其对 的反应原性结果显示成功克隆 基因长度为 编码 个氨基酸 结果显 示 蛋白主要以包涵体形式表达 蛋白大小约为 分析可知纯化后 蛋白 条带单一同时 蛋白与 细胞毒有良好的反应原性经生物分析软件预测可知 蛋白为非分泌 蛋白无跨膜区有多个磷酸化位点参与蛋白的水解过程 蛋白酶作为 基因组编码蛋白中唯一的蛋白 酶在病毒复制的过程中具有不可或缺的作用本研究成功构建了 蛋白原核表达载体并对其结构进行 了预测为进一步研究 蛋白的作用及催化机理奠定基础 关键词脑心肌炎病毒 蛋白酶原核表达生物信息学分析 中图分类号 文献标识码