第三章生物技术药物的制造进程.ppt

第一节生物技术药物生产简介 2、选择基因载体构建重组NDA 在体外将含目的基因的DNA片段和具有自我复制功能、并带有选择标记的载体分子进行酶切连接，获得重组DNA分子。常见基因载体有质粒、噬菌体（phage）、黏粒（cosmid）、病毒载体等。 3、将重组DNA分子导入宿主细胞 采用特定的方法将重组DNA分子转移至适当受体细胞（也称寄主细胞），并与之同步增殖。被导入的受体细胞分为两大类：第一类为原核细胞，第二类为真核细胞 导入的方法主要有转化、转染等方法，此外也可采用电融合、显微注射和基因枪等技术。 纯化方法对重组蛋白的化学性质、构象等都有重要影响，合理的纯化方法至少要包括以下几方面: 纯化步骤少 产物的纯度、活性及其他检测指标达到规定要求 得率高 在确定纯化工艺时要多借鉴必威体育精装版的分离纯化技术并计算相关技术成本,要考虑到将来生产工艺放大以后的可行性，在研制阶段所得出的实验数据,要为将来的生产放大提供充分的依据。 在现实中,有许多厂家!企业拿到某种产品的新药证书和生产批文,但市场上迟迟见不到该品种上市的现象比比皆是，除生产厂家有自己的产品上市销售安排之外,生产工艺先天不足也是一个主要的原因。 稳定性考察是对产品的剂型、配方及储存条件确定的综合评价。特别是基因工程药物,稳定的生物活性是其安全有效的保证，应在充分研究同类或相近产品的稳定性考察温度和本品的生物化学性质的基础上,制订好考察周期,根据质检规程的要求进行检测为产品的有效期确定提供科学依据。 NDV-F（新城疫弱毒株）诱生人脐血干细胞，提取mRNA，反转录成DNA，构建质粒，经克隆筛选获得有目的基因的质粒pBV867,转化到大肠干菌中，干扰素基因在启动子控制下转录。发酵，收集对数期生长的的pBV867工程菌，用溶菌酶或高压匀浆破菌后，裂解液用85%硫酸胺盐析，酸化使70%杂蛋白变性，然后过CM-22和DEAE-22离子交换层析，分段洗脱，超滤浓缩，再过干扰素单抗亲和层析柱，可纯化2500倍，纯度达95%以下，经分装，冻干即成。 二、生物技术药品质量保证要素 （一）药典（pharmacopia） （二）质量保证体系 药品的质量保证起始于新药的研究与开发 ，并贯穿于生产销售和使用的各个环节。 1.研究与开发者，临床前研究，GLP(good laboratory practice 药品非临床研究质量规范) 2.临床研究单位，GCP(Good clinical practice 药品临床试验管理规范) 3.药品生产企业 ，GMP(Good Manyfacturing practice 药品生产质量管理规范) 4.药品经销商，GSP(Good supplying practice 医药商品质量管理规范) 5.医院，消费者，GUP(Good use practice 医药商品使用管理规范) 6.中药栽培企业，GAP（Good Agriculrure Practice 中草药栽培规范） 7. 医院药房和药剂科，GPP（Good Pharmacy Practice 医院药房质量管理规范） 综合性质量保证 质量控制 QA—— GMP ——QC GMP的具体工求： 1.制订完整的生产工艺，并能作系统回顾检查。 2.关键生产工艺及其重大变更都经过验证。 3.GMP必要的资源均已落实。 4.相关设施有适当的书面操作指南和规程。 5.操作人员经培训能按规程正确操作。 6.生产过程均有记录，所有重大偏差记录完整并进行了全面调查。 7.药品的生产记录妥善保存，方便查阅，可追溯每一批产品的全部历史。 8.产品发运将影响质量的风险降至最低限度。 9.已建立完整的体系，可撤回任何一批已发放上市的产品 10.对上市药品的所有投诉进行查处，调查造成质量缺陷的原因，并采取整改及预防措施。 (三)生产车间与设备 制制药车间设备包括生产专门设施区、质量控制区和贮存区。 洁净区是安装有制药设备并受严格环境洁净控制的区域，注射剂或无菌生物药物必须在洁净区生产，洁净区需特殊设计以防止产品受到污染，常见的污染物有微生物与颗粒物质。 洁净区的环境监测：空气悬浮粒子标准监测 　　　　　　　　　微生物限度监测 　　　　　　　　　人员监测 (四)制药用水系统  纯化水和注射用水系统 纯化水：为原水经离子交换法、反渗透法、蒸馏法或其他适宜方法制得的供药用的水，不含任何附加剂，可作为配制普通药物制剂用的溶剂或试验用水，不能于注射剂的配制。 注射用水：为纯化水经蒸馏所得的水，应符合细菌内毒素实验要求，可作配制注射剂用的溶剂。 （五）生产许可 1、工艺规程 阐述生产一定量的某一药品所需原料、辅料、包装材料、半成品和成品的