草酸钙晶体刺激下人巨噬细胞高迁移率族蛋白b1的表达.pdfVIP

中国组织工程研究 第 19 卷 第 11 期 2015 –03 –12 出版 Chinese Journal of Tissue Engineering Research March 12, 2015 Vol.19, No.11 www.CRTER.org 草酸钙晶体刺激下人巨噬细胞高迁移率族蛋白B1的表达 黄 鹏，邓耀良，黎承杨，陶芝伟，王 翔，奉有才，吴 博(广西医科大学第一附属医院泌尿外科，广西壮族自治区南宁市 530021) 文章亮点： 1 目前在肾结石中高迁移率族蛋白B1 的释放规律尚缺乏深入的研究。实验拟采用一水草酸钙晶体刺激巨噬细 黄鹏，男，1987 年生，广 胞，观察一水草酸钙刺激后高迁移率族蛋白B1 表达的情况，从炎症蛋白分泌的角度是探索炎症在泌尿系结石 西壮族自治区德保县人， 壮族，2014 年广西医科大 成因中的作用。 学毕业，硕士，主要从事 2 实验结果表明，一水草酸钙可以诱导人巨噬细胞高迁移率族蛋白B1 的表达及mRNA 表达增加；诱导人巨 泌尿外科研究 噬细胞内肿瘤坏死因子α和白细胞介素6 的表达增加，且高迁移率族蛋白B1 表达的时间明显晚于肿瘤坏死 因子a 和白细胞介素6 的释放时间。 中图分类号:R318 关键词： 文献标识码:B 文章编号:2095-4344 组织构建；组织工程；高迁移率族 B1；一水草酸钙；巨噬细胞 (2015)11-01712-05 主题词： 稿件接受：2015-01-06 高迁移率族蛋白质类；草酸钙；巨噬细胞 http://WWW. 摘要 背景：研究发现在肾结石模型中肾间质晶体周围存在大量单核/ 巨噬细胞浸润，显示巨噬细胞可能参与晶体在 肾脏中的沉积过程，而巨噬细胞是人体重要的固有免疫细胞，在肾脏中沉积的大量的单核/ 巨噬细胞吞噬晶体， 会产生一些炎症因子损伤和破坏肾小管上皮细胞，最终有利于结石的形成。 目的：探讨一水草酸钙晶体刺激人巨噬细胞后高迁移率族蛋白 B1 的表达水平。 方法：用 100 mg/L 的一水草酸钙刺激巨噬细胞，分别于刺激后0，6，12，24 和36 h，用Western blot 检 测细胞总蛋白和细胞浆内高迁移率族蛋白B1 的含量；用实时荧光定量PCR，检测细胞中高迁移率族蛋白B1 mRNA 表达情况；分别于一水草酸钙刺激后0，1，2 和4 h ，用酶联免疫吸附实验测定细胞培养液上清中肿 瘤坏死因子 α和白细胞介素 6 的水平。 结果与结论：一水草酸钙刺激后 0-6 h 细胞浆内高迁移率族蛋白B1 的含量较低，刺激后12-36 h 细胞浆内高 迁移率族蛋白B1 逐渐增加。一水草酸钙刺激后0-6 h，巨噬细胞总蛋白中高迁移率族蛋白B1 含量不高，在 刺激后12 h细胞总蛋白