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材料和方法材料组织和细胞的来源仪器设备机械组织匀浆器低温高速离心机超速离心机超生细胞破碎仪超纯水装置试剂三氯醋酸丙酮二硫苏糖醇尿素乙醇磷酸考马斯亮蓝抑肽素亮肽素试剂纯度均应是分析纯或以上溶液配制溶于水中用调至用纯水定容至储存液溶于纯水中用调节值至约需颗粒定容为可高压灭菌后分装备用亮肽素储存液溶于水保存使用时配成储液保存抑肽素储存液溶于甲醇保存使用时配成储液保存储存液溶于异丙醇中保存储存液溶于中保存或含有的溶液不能进行高压处理可过滤除菌裂解液蛋白酶抑制剂混合物和在临用前加入蛋白酶抑制剂混合物成分终
1?材料和方法 1.1?材料 1.1.1?组织和细胞的来源: 1.1.2?仪器设备 ?机械组织匀浆器 低温高速离心机?(40,000?g) 超速离心机 超生细胞破碎仪 超纯水装置? ? 1.1.3?试剂 ?三氯醋酸?(TCA) 丙酮 二硫苏糖醇?(DTT) 尿素 CHAPS? PMSF? EDTA? 乙醇 磷酸 考马斯亮蓝R350?? 抑肽素A? 亮肽素 试剂纯度均应是分析纯或以上。1.1.4?溶液配制? (1)???PBS:? NaCl?8?g,?KCl?0.2?g,?Na2HPO4?1.44?g,?KH2PO4,溶于800?ml水中
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