PCR 结合表型鉴定对超高压处理后的冷藏带鱼细菌 - Ingenta Connect.PDF

第 32 卷 第 5 期 农 业 工 程 学 报 Vol.32 No.5 2016 年 3 月 Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering Mar. 2016 307 PCR 结合表型鉴定对超高压处理后的冷藏带鱼细菌菌相分析 谢 晶，刘 骁，杨 茜，钱韵芳，张新林 （上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心，上海海洋大学食品学院，上海 201306 ） 摘 要：为了研究超高压处理对带鱼微生物菌群组成的影响，该文通过形态学特征、生理生化鉴定、16S rRNA 序列分析 鉴定及系统发育树的建立，分别分析 290 MPa 、6 min 超高压处理前后于 4 ℃冷藏 12 d 内的带鱼菌相变化，最终分离筛选 到 24 株不同特征的纯化菌株。结果显示，带鱼初始菌相中出现的布式假单胞菌（Pseudomonas brenneri ）、黄褐假单胞 菌（Pseudomonas fulva ）、粪嗜冷杆菌（Psychrobacter faecalis ）菌株，经超高压处理后的样品中未能筛选到；波罗的海希 瓦氏菌（Shewanella baltica ）、隆德假单胞菌（Pseudomonas lundensis ）、嗜根寡养单胞菌（Stenotrophomonas rhizophila ）、 表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis ）、氧化微杆菌（Microbacterium oxydans ）等微生物在超高压处理后的贮藏期 间数量逐渐减少至消失；另有一些微生物在贮藏期间逐渐恢复生长，如 Rhizobium larrymoorei 、Microbacterium halimionae 、 溶酪大球菌（Macrococcus caseolyticus ），而奥斯陆莫拉菌（Moraxella osloensis ）、藤黄微球菌（Kocuria rhizophila ）、 产乳酸菌素的肉杆菌（Carnobacterium maltaromaticum）、西宫皮肤球菌（Dermacoccus nishinomiyaensis ）等受超高压的影 响较小，尤其是产乳酸菌素的肉杆菌（Carnobacterium maltaromaticum ）占好氧菌和厌氧菌菌落总数的比例均较高； Leucobacter aerolatus 、成团泛菌 （Pantoea agglomerans ）、结肠炎耶尔森杆菌 palearctica 亚种 （Yersinia enterocolitica subsp. palearctica ）、Chryseobacterium vrystaatense、鼠李糖短杆菌（Brachybacterium rhamnosum ）在贮藏末期出现。从带鱼冷藏 过程中细菌的组成与变化分析可见，超高压处理对革兰氏阴性菌的抑菌效果较好，而革兰氏阳性菌对超高压处理的耐受 性较强。在超高压技术的影响下，致腐败能力较强的微生物被抑制，腐败能力稍弱的微生物成为优势菌，这可能是超高 压技术能够有效延长带鱼货架期的因素之一。 关键词：细菌；冷藏；杀菌；超高压技术；带鱼；聚合酶链式反应（PCR ）；生理生化鉴定；菌相 doi ：10.11975/j.issn.1002-6819.2016.05.045 中图分类号：TS254.7 文献标志码：A 文章编号：1002-6819(2016)-05-0307-08 谢 晶，刘 骁，杨 茜，钱韵芳，张新林. PCR结合表型鉴定对超高压处理后的冷藏带鱼细菌菌相分析[J]. 农业工程 学报，2016，32(5)：307－314. doi ：10.11975/j.issn.1002-6819.2016.05.045 Xie Jing, Liu Xiao, Yang Xi, Qian Y