三种分析水稻F1代幼苗生长过程中酯酶同工酶变化的电泳方法比较.pdfVIP

植物生理学通讯 第44卷 第5期，2008年 10月 977 三种分析水稻F代幼苗生长过程中酯酶NT酶变化的电泳方法比较 彭元成 ，，宋春霞 ，严敏3,4 曲阜师范大学 生命科学学院，化学学院，J【J东曲阜273165；华南农业大学生命科学学院，广州I510642；青岛农业大学植 物科技学院，山东青岛266109 ComparisonofThreeElectr0ph0resisM ethodsUsedinAnalyzingChangesof EsteraseIsoenzymesinSeedlingGrowthofF1HybridRice(OryzasativaL．) PENG Yuan—Cheng，’，SONG Chun—Xia。，YAN M in CollegeofLfieSciences．2CollegeofChemistrySciences,QufuNormalUniversity,Qufu．Shandong273165,China；3CollegeofLfie Sciences，SouthChinaAgriculturalUniversiyt,Guangzhou510642，China；CollegeofPlantScienceandTechnolog~Qingdao AgriculturalUniversiyt，Qingdao,Shandong266109,China 提要：利用聚酯胶片作为凝胶支持物的超薄等电聚焦电泳(uTL1EF)研究水稻F种子萌 过程中的酯酶同工酶多态性变化 的结果表明，UTLIEF相比非变性不连续聚丙烯酰胺电泳(native—PAGE)和常规等电聚焦电泳(IEF)得到的酯酶同工酶图谱更 清晰，酶带数 目和强弱的多态性变化更高，用pH2~9的两性电解质时等电聚焦的电泳效果较好。 关键词：水稻；酯酶同工酶；非变性不连续聚丙烯酰胺电泳；等电聚焦；超薄等电聚焦 酯酶(esterase，EST)是一类能催化酯类化合物 充分，对活性较弱的酶带影响较大(Wouters#HBooy 水解 的酶，多为单体酶，以单链蛋白或二聚体蛋 白 2000)。水稻种子萌发过程 中酯酶同工酶的变化可 的形式在植物体中广泛存在(Arulsekar等 1986： 能比较细微，因而选择合适的电泳方法比较关键。 Tabaeizaeh等 1986)。同工酶是指能催化相同的化 本文尝试用超薄等电聚焦 电泳(ultrathin—layeriso． 学反应，但酶蛋 白分子结构，理化性质甚至免疫学 electricfocusingelectrophoresis，UTLIEF)来分离水 性质都不同的一组酶。目前发现的酯酶同工酶约 稻种子发育过程中的酯酶同工酶，并与native—PAGE 有20余种，在植物的不同种属和 同一植物的不同组 电泳和 IEF电泳进行 比较，以期能找到一种更准 织中，酯酶同工酶的组成也是不同的，它具有较高 确、更快速的酯酶同工酶电泳分离方法。 的组织特异性(Collet等2005；丁玲等2007)。同工 材料与方法 酶是基因表达的产物，Pretovfi等(2001)的研究表明， 实验材料为水稻(OryzasativaL．)品种 培‘矮 亚麻中酯酶同工酶的组成具有时间特异性，即不同 64S’×E‘P431’的F种子和 培‘矮64S’×G‘67’的F 时间段 内酯酶的组成也是不同的。而 目前水稻 中 种子，两性电解质为LKB公司产品，聚酯胶片为 相关的报道较少，因此研究水稻种子萌发过程 中酯 Pharmacia公司产品，聚丙烯酰胺为上海伯奥公司分 酶同工酶带的数 目和活性变化，进而揭示水稻 中酯 装，坚牢蓝、0c一萘 乙酸和 B一萘 乙酸为 国产分析 酶的时间特异性，将会有助于研究水稻的生长发育