基于cgcA基因实时荧光PCR快速检测穆汀斯克罗诺杆菌的研究.pdfVIP

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2016, Vol.32, No.2 基于cgcA基因实时荧光PCR快速检测 穆汀斯克罗诺杆菌的研究 1 1 1 2 1 庄平 ，余以刚 ，胡双芳 ，李蓉 ，肖性龙 （1.华南理工大学轻工与食品学院，广东广州 510640）(2.中山出入境检验检疫局，广东中山 528403） 摘要：为实现奶粉中常见污染菌穆汀斯克罗诺杆菌的快速检测与控制，本文根据cgcA 基因序列设计出特异性探针和引物，建立 了运用实时荧光定量PCR 法检测穆汀斯克罗诺杆菌的反应体系和反应条件，并对该法的特异性、灵敏度、稳定性进行评价，并进行 人工染菌样品检测实验。特异性结果表明，对穆汀斯克罗诺杆菌的荧光 PCR 检测结果的特异性为 100%；灵敏度结果表明，穆汀斯克 罗诺杆菌检出限在 440 cfu/mL；稳定性结果表明，穆汀斯克罗诺杆菌组内实验 CV 在 0.48~0.69%之间波动，而组间实验 CV 在 0.69~0.73%之间波动；人工染菌样品试验表明，在增菌 6 h 后能检出阳性。本研究所建立的实时荧光定量 PCR 法特异性好、灵敏度高、 稳定性强，有望成为快速检测食品中穆汀斯克罗诺杆菌污染的新方法，具有很好的研究价值和应用前景。 关键词：穆汀斯克罗诺杆菌；荧光定量 PCR ；检测 文章篇号：1673-9078(2016)2-296-301 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.2.043 Rapid Detection of Cronobacter muytjensii by Real-time PCR Based on cgcA Gene 1 1 1 2 1 ZHUANG Ping , YU Yi-gang , HU Shuang-fang , LI Rong , XIAO Xing-long (1.College of Light Industry and Food Sciences, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China) (2.Zhongshan Entry-Exit inspection and Quarantine Bureau, Zhongshan 528400, China) Abstract: To achieve the rapid detection of the common contaminating bacteria C. muytjensii in milk powder, specific probes and primers were designed based on the cgcA gene. The reaction system and reaction conditions for the detection of C. muytjensii were developed using quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR) assay. Additionally, the specificity, sensitivity, and reproducibility of this method were evaluated, and the method was a