小鼠技术.PPT

小鼠技術 保定.灌食.注射.抽血 動物實驗組 張秀琪 注射量 抽血量 每次抽血最大安全量= 1% of body weight Ex: 3kg rabbit x 1%= 30ml blood 最大總血量 =6% of body weight Ex: 3kg rabbit x 6%= 180ml blood (一般3-4%) 每日製造血量 0.75 ~ 1.0 ml/kg/day of blood Ex: 3Kg x 1 ml/kg/day = 3 ml/day → 10天後,製造 30ml blood 餵食量 麻醉量—管制藥 Pentobarbitol + Saline: 0.1+0.5= 0.6 ml 每隻給予0.1ml (IP) Isoflurane: (需搭配小動物麻醉機+抽氣櫃) 1. 將動物放入密閉chamber 2. 調整流速至0.8-1.5 L/min 3. 調整isoflurane 噴霧器至2- 3% 4. 維持麻醉狀態,使用mask整個罩住頭部; 調整流速400-800ml/ min 5. 避免失溫,可使用檯燈或照燈或小面巾蓋住 Ketamine + Xylazine(Ropum)=10:1 (50mg/ml) (20mg/ml) 1. 取2 ml Ketamine + 0.5 ml Xylazine, 加滅菌水至10ml, 混勻 2. 標明於管上(Ketamine+Xylazine), 0.1 ml/ 10g, 配藥時間, 有效期間(以最早過期的藥為基準,最久不超過3個月) 3. 避光, 放冰箱 4. 給予0.1ml/ 10g, IP ( 100 mg/kg ketamine and 10 mg/kg xylazine !!) 5. 需要追加時, 給予1/2 劑量 6. 避免失溫,可使用檯燈,照燈或小面巾 麻醉量—非管制藥 舒泰50 + Xylazine (Ropum) IP.IM → 舒泰50 Xylazine dilute 5倍使用 → Mice (約20g) 舒泰50 0.1ml/隻 + Xylazine 0.05ml/隻 內容: 保定 灌食 注射-IP (腹腔注射) IM (肌肉注射) SC (皮下注射) IV (靜脈注射) 抽血-眼窩抽血 其他採血法(剪尾巴.割尾動脈) 心臟採血-抽血或犧牲時 保定:( ICR. C57BL/6較兇; BALB/c 較溫馴) 灌食 注射-IP 注射- IM 注射-SC 注射-IV 抽血-眼窩採血 其他採血法(上: 剪尾採血. 下:尾動脈採血) 心臟採血 *參考資料: 實驗動物技術教育光碟 [第1集]- 大.小鼠- 保定. 灌食. 注射. 採血 ~~歡迎指教~~ * * 20G 5-10 ml 21G 0.3 ml 21G 5-10 ml 23G 0.5 ml Rat 20G 30-50ml 23, 24G 0.5-1ml 21G 50-100ml 21G 1-5 ml Rabbit 20G 2-3 ml 23G 0.05 ml 21G 2-3 ml 25G 0.2 ml Mice 皮下 (SC) 肌肉 (IM) 腹腔 (IP) 靜脈 (IV) 途徑 種類 15 12-18 Mice 10-12 5-6 Rat 10-12 4-6 Rabbit Water intake ml/ 100g BW Feed intake g/100g BW 動物種類 (餵食管) (2-3 inch) (1-11/2 inch) 小鼠放在鐵蓋上 靠拇指.食指抓取皮層 尾巴夾在無名指與小指之間 正面 側面 1 3 2 4 小方巾 蓋住上半身 露出右小腿 食指. 中指 夾住右小腿 插入. 回抽. 打入. 完成 讓小鼠趴在鐵蓋上, 右手拉尾巴, 左手抓起皮層保定 插入皮層, 回抽後, 打入,完成 照燈, 烤熱 靜脈擴張, 清晰可見 保定小鼠 平行下針 回血 打入,完成 50ml離心管打洞, 前端塞紗布 1 3 4 2 眼瞼蓋上 0.5 C.C. 割沿著肛門下來的 尾動脈 角度300 慢慢插入,有回