犬瘟热病毒一步RT_PCR检测方法的建立_张洪亮.pdfVIP

2012 44 1 ·49 · 畜牧与兽医 年 第 卷 第 期 欀欀欀欀欀氈 欀 氈 欀 欀 欀 RT-PCR 欀 兽医 犬瘟热病毒一步 检测方法的建立 欀 欀 欀 科技 欀 1 1 2 1 氈 欀 氈欀欀欀欀欀 ， ， ， ， 张洪亮 孟培培 宋晓明 杨瑞梅 1 1 1* 1* ， ， ， 秦晓冰 丰艳妮 黄 娟 单 虎 (1． ， 266109 ; 青岛农业大学动物科技学院 山东青岛 2 ． ， 264500) 乳山市畜牧局 山东乳山 摘要: (CDV) Onderstepoort (N) 1 ， 根据犬瘟热病毒 弱毒株 的核蛋白 基因的相对保守区序列设计了 对特异性寡聚核苷酸引物 在国内首次建立 CDV RT-PCR 。 N 265 bp ， 0. 043 6 g / mL RNA ， RT-PCR 了 一步 检测方法 该法可以特异地扩增出 基因 大小的目的片段 可以检测到 μ 的总 与两步法 。 25 ， RT-PCR 17 ， RT-PCR 94. 4 % ， 的敏感性相当 对 例犬瘟热临床疑似病例样品 一步法 检测出 份阳性 与两步法 的阳性符合率达 胶体金检测试 13 。 ， CDV RT-PCR 、 、 ， CDV 。 纸条检测出 份阳性 研究结果表明 建立的 一步法 检测方便 敏感 特异 适用于 临床病料的检测和分子流行病学调查 关键词: ; RT-PCR ; 犬瘟热病毒 一步 检测 中图分类号:S852. 65 文献标识码:A 文章编号:0529-5130 (2012)01-0049-04 犬瘟热病毒 (canine distemper virus ，CDV)是引 1. 2 主要试剂 、 DMEM Gibco ; 起犬科 鼬鼠科及部分浣熊科多种动物犬瘟热 培养基购自美国 公司 标准胎牛血 (Canine distemper ，CD) ［1