放线菌JXJ-35次生代谢产物的初步研究.pdfVIP

2007年第6期 九江学院学报 Journal of jiujiang University (总第143期) No，6，2007 (Sum NO 143) 放线菌JXJ一35次生代谢产物的初步研究 沈显斌 赵雪平2 王子洪。 (1德安第二中学 江西德安 330400；2广州市真光中学 广州 510380；3九江学院附中 332000) 摘要：通过对放线茵JXJ一35茵株发酵液的初步分离纯化，得到4个化合物，由波谱 解析鉴定为：豆甾一4一烯一3，6一二酮 (1)，胡萝卜苷 (2)，2，6一二甲基一2，6一二 羟基一庚一4一酮 (3)，槲皮素 (4)。其中槲皮素据报道有抗肿瘤活性。 关键词：放线茵；次生代谢产物；抗肿瘤活性 中图分类号：Q 93 文献标识码：A 文章编号：1673—4580(2007)06～0069一(02) JXJ一35是从江西省庐山土样中分离获得纯培 2 方法 养的一株放线菌，其次生代谢产物粗提物经检测， 2．1培养基灭菌和菌株固体发酵方法 发现具有抗肿瘤活性。因此，笔者对该菌株次生 2．1．1培养基灭菌方法 代谢产物进行了初步研究，寻找其抗肿瘤活性成 种子培养基：121℃湿热灭菌30 min；固体发 分。在此过程中，发现了四个化合物：豆甾一4一 酵培养基121℃湿热灭菌60 min，并在培养基冷却 烯一3，6一二酮 (1)，胡萝卜苷 (2)，2，6一二 前将其震散。 甲基一2，6一二羟基一庚一4一酮 (3)，槲皮素 2．1．2菌株培养方法 (4)。 将培养两天的种子液接人灭菌后并冷却至室 1 仪器和材料 温的固体发酵培养基中，于28℃温室中静置培养 1．1菌株与培养基 8天。 1．1．1菌株 2．2提取与分离 放线菌JXJ一35是从中国江西省庐山土样中 培养后固体发酵物经经丙酮浸泡24 h，超声 分离获得纯培养的。 破壁30min，再真空抽滤，滤液蒸去丙酮，剩下一 1．1．2培养基 部分水，先以石油醚萃取 (I)，再以乙酸乙酯萃 种子培养基：淀粉24 g，葡萄糖1 g，牛肉膏 取 (Ⅱ)，萃取液蒸去部分溶剂，以硅胶拌样，干 3 g，酵母膏5 g，蛋白胨3 g，CaCO3 4 g，复合维 燥后以干法上硅胶柱。石油醚萃取相I以石油醚： 生素3．75 mg，定容至1 L，pH7．0； 丙酮分段洗脱 (10：1一…一0：1)，得到化合物 固体发酵培养基，大米：大豆粉：米糠：水 1(70mg)，化合物2(95 mg)；乙酸乙酯萃取Ⅱ =5：3：2：1O，水pH7．8，每500 ml三角摇瓶 经硅胶柱层析，以氯仿：甲醇分段洗脱 (2O：1一 装培养基200g。 …一0：1)，得到化合物 3(73 mg)和4 1．2分离鉴定仪器及试剂 (32mg)。 元素分析用德国Vario EL有机元素分析仪； 2．3结构鉴定 质谱用VG Auto Spec一3000型质谱仪测定；核磁 化合物 1，无色鳞片状结晶，TLC展开后 共振用 Bruker AV．DRX500测定；红外用 AVA— uV嘲 下无暗斑，Anis(茴香醛)显色剂显黄 TAR360F—IR测定；薄层层析硅胶板和柱层析硅 色。 H NMR(CDC1