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健心颗粒的质量标准研究[摘要]目的：建立健心颗粒颗粒质量标准，从而有效的控制健心颗粒的质量。方法：用薄层色谱法对该处方中的丹参药材进行定性鉴别; 采用高效液相色谱法测定丹参酮ⅡA的含量。结果: 薄层色谱鉴别斑点清晰；HPLC法测定灵敏度高，进样量在13.93μg-198.38μg范围内与峰面积值呈良好的线性关系（r2=0.9997），阴性对照无干扰。结论: 该法操作简便, 测定结果准确,专属性强, 可作为该制剂的质量控制方法。关键词健心颗粒；质量标准；薄层色谱法；高效液相色谱法；阿魏酸慢性心力衰竭在中医诊断学中称“心悸”、“水肿”喘证”、等，为根虚表实的症候，本虚多为心脏、脾脏、肾脏的阳气不足，常见的表实多为血瘀、痰浊、水饮，而气虚则是慢性心力衰竭的相同的发病原因[1]。本次试验的健心颗粒为自制，主要由丹参、桂枝、猪苓、蒲黄、黄芪、红参、白术、葶苈子几种中药构成，具有活血化瘀，益气温阳等功效，可用于治疗慢性心力衰竭中合并的心气虚弱和血瘀症状。为控制该药品的质量,本研究对该方剂中的君药丹参进行了薄层色谱鉴别, 并采用高效液相法测定丹参中丹参酮ⅡA的含量，同时进行方法学考察，结果显示: 此方法准确度高，可靠性高，可用于健心颗粒的质量控制。仪器与试药仪器：KQ3200DE 型医用数控超声仪（昆山市超声仪有限公司）；RE-51BA旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；ZF-501多功能紫外投射仪（上海顾村电光仪器厂）；德国DIONEX P680高效液相色谱仪（PDA检测器）。1.2 试药：丹参对照药材（批号：110766-200628），丹参酮ⅡA标准品（批号130937-200632）均购自中国药品生物制品检定所，健心颗粒（自制），缺丹参阴性样品。甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。薄层色谱鉴别2.1供试品溶液的制备取本品约6g，仔细研磨，加乙酸9mL,时时振摇，静置1h，滤过，旋干滤液，残渣加醋酸乙酯2mL使溶解，作为供试品溶液。2.2 对照药材溶液制备取丹参对照药材0.2g,同法制成对照药材溶液。2.3 阴性供试品溶液制备按处方项取各味药材（除丹参外），取阴性药品颗粒10g按2.1项目下方法制备即可。2.4 测定方法依据TLC(药典2010年版一部附录VI B)进行操作，吸取上述溶液各10μL，分别点于相同硅胶G薄层板上，将石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯(8：2)作为展开剂，展开，取出，吹干。在供试品的色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的斑点。阴性样品色谱在与对照品色谱相应的位置上，不显斑点。 1 2 31. 阴性对照溶液5μl 2. 供试品溶液5μl 3. 对照药材溶液5μl3 丹参酮ⅡA含量测定3.1 样品溶液制备3.1.1 健心颗粒的制备单取红参粉碎成细粉，备用。取丹参，加70%乙醇提取二次,每次1小时,过滤,合并滤液;取黄芪、猪苓、白术、桂枝、蒲黄、葶房子和丹参药渣混合，加适量水煎煮二次，每次1h，过滤，合并滤液。合并醇提滤液和水提滤液，浓缩，将得到浸膏按处方比例加入红参细粉和适量糊精与混合，制粒，即为本品[2]。3.1.2 阴性颗粒的制备按3.1.1项目下方法制备，不加如丹参药材，即可。3.1.3对照品溶液的制备精密称取丹参酮ⅡA对照品适量, 加色谱甲醇制成每1mL含丹参酮ⅡA20.3μg的溶液, 即得。3.1.4 供试品品溶液的制备取本品颗粒15g，精密称定置具圆底烧瓶中，精密加入70%甲醇30ml，密闭，称定重量，回流加热20min，放冷。称重，加适当的已经70%甲醇至与原重相同，摇匀，静置，取上清液滤过，取续滤液，即得[3]。3.2 实验方法与结果[4-5]3.2.1 色谱条件色谱柱为C18柱（250mm×4.5mm，5μm，上海月旭科技股份有限公司）；以甲醇-乙腈-甲酸-水(20:10:1:69)流动相；测试得到的λm为287nm；柱温35℃；流速为1mL·min-1，进样量为15μL，理论板数按丹参酮ⅡA计算应不低于2000。3.2.2 线性关系的考察在上述色谱条件下分别进样2、4、6、10、20、30μL对照品溶液，记录色谱图，以进样量为横坐标,以峰面积为纵坐标进行线性回归，得回归方程：Y= 2.2759X-0.2442。r2=0.9997，线性范围13.93μg-198.38μg范围内，呈现良好的线性关系。进样体积（μl）进样量（μg）峰面积213.02924.4418426.65849.0835639.9087613116821.709120133.146045.412830200.262068.12733.2.3 精密度实验精密量取对照品溶液进样6次,每次10μl, 注入液相色谱仪，峰面积的RSD=0.87%