砒霜治疗肝癌的研究.docxVIP

砒霜治疗肝癌的研究1.课题的立项依据肝癌是我国常见的恶性肿瘤，死亡率高，目前尚缺乏有效的治疗手段，寻找新的治疗药物和治疗手段具有重要意义。三氧化二砷(Asz0。)是中药传统毒药，自从我国学者首先用Aszos治疗急性早幼粒细胞性白血病取得显著疗效后，近年来人们开始研究Asz0。对实体肿瘤的作用和机制，试图扩大其临床应用的范围。相继在抗食管癌、大肠癌、胃癌、神经母细胞瘤、胰腺癌、宫颈癌、卵巢肿瘤、前列腺肿瘤等实体瘤的实验和动物研究取得了令人瞩目的进展。砒霜还具有杀伤肿瘤干细胞的作用。肿瘤干细胞，认为是肿瘤生长和耐药的根源。传统的化疗药物，往往对处于G0期的肿瘤干细胞没有作用。而砒霜不但可以作用于普通肿瘤细胞，且同时作用于肿瘤干细胞，诱导两种细胞的凋亡，且对正常细胞基本没有影响，副作用小，价格低廉，是目前发现的为数不多的可作用于肿瘤干细胞的药物。较多的实验研究证明Asz 03可以抑制多种肝癌细胞系如SMMC一7721、QGY7701、QGY 7703、HepG2、BELr7402和HLE细胞的生长；As。0。在体外能够抑制肝癌细胞的增殖，诱导细胞凋亡。As：0。与化疗有协同作用【1】；能抑制端粒酶的活性；有可能可上调抑癌基因P16、癌转移相关基因纳米23的表达；对CD44有抑制作用，因而可能有抑制肿瘤转移的作用口2 3；可使肝癌细胞分泌的免疫抑制物减少，NK细胞活性提高，CD4+含量增加，巨噬细胞活性增强，从而改善机体的免疫功能【2】；可以明显抑制人肝癌细胞株BEL-7402的VEGF基因表达蛋白，可能有抗肝癌血管生成的作用。自1992 年哈尔滨医科大学报道了三氧化二砷 （以下简称 As203）治疗 APL 取得满意疗效后【3】，近年来，As203在实体瘤方面的研究也逐渐增多。我国学者已发现 As203治疗 APL 的主要机制是通过诱导细胞凋亡实现的；同时化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡的研究已成为发现新的化疗药物的一个重要手段。陈俊强等【4】建立肝癌裸鼠移植瘤模型，应用TuNEL法观察不同浓度的As：O。对裸鼠移植瘤凋亡指数(AI)的影响；应用免疫组化sABC法检测不同浓度的Aszos对增殖细胞核抗原阳性细胞指数(PI)的影响；检测移植瘤裸鼠的wBC并进行骨髓涂片检查。结果经Asz O。治疗的移植瘤裸鼠的骨髓有核细胞增生活跃，粒红比例正常，巨核细胞多见；低、中浓度As：0。治疗裸鼠移植瘤的AI高于对照组(Po．01和Po．05)；高浓度组AI与对照组比较无显著性差异(Po．05)。低、中浓度组PI低于对照组(Po．01)；高浓度组PI与对照组比较无显著性差异(Po．05)。表明Asz0。通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡而达到其抗肝癌的效果，As：03对移植瘤裸鼠骨髓无抑制作用。Xu等n41建立肝癌裸鼠移植瘤模型，用免疫组织化学检测AFP浓度，测定肿瘤重量及用电子显微镜观察等方法，发现Asz 0s能够抑制肿瘤生长：2．5 mg／kg Asz03第10天的抑制率为53．42％；5mg／kg第5天为79．28％，第10天为96．58％。电镜发现明显的线粒体改变及典型的凋亡改变。张侗等口5]以DEN灌胃制备大鼠肝癌模型，在光镜、透射电镜下观察肝癌细胞的形态学改变，采用流式细胞仪，行碘化丙啶／异硫氰酸荧光素双染色，定量检测肝癌细胞凋亡。本实验结果发现不同剂量As。O。诱导肝癌细胞凋亡的程度不同：剂量适中，肝癌细胞凋亡率最高；剂量过高时，诱导肝癌细胞凋亡作用并非最强，而且可致细胞毒杀伤作用，可能对正常肝细胞产生细胞毒杀伤作用。建立小鼠实体型及HepA腹水型肝癌模型，用Asz0。处理，对肝癌荷瘤鼠具有显著的抑瘤和生命延长作用，未见明显毒副反应，而5一FU组小鼠出现不同程度的进食下降、活动减少、反应迟钝、体重增长缓慢。这种效应伴随着细胞在G2／M期的聚集(G2／M期限制)和Bcl_2／Bax的下调，并出现Bcl—2／Bax最低值和凋亡细胞数量高峰值。镜下观察癌细胞成典型的凋亡变化，AFP表达率下降。祖国医学源远流长，博大精深，应用中医药治疗恶性肿瘤独具特色，能改善肿瘤病人的临床症状，提高生存质量，还能在一定程度上控制或稳定肿瘤，有助于延长生存时间，且毒副作用较小，但传统中药给药途径往往限于口服或外用，成分复杂，机理不明，客观疗效低，可重复性差，极大地限制了其临床推广应用。近年来，我国学者不断探索，应用现代化制药技术从中药中分离提纯抗癌有效成分，应用于临床。综上所述，本课题拟结合以往研究工作，我们希望开展了 As203诱导肝癌细胞凋亡的研究，以探讨其在肝癌化疗中的可行性。[ 参考文献 ]【1】XuHong—yu，Yang You—lin，Liu Shu—mei，以nZ．Effectof arsenictrio)【ide on human hepatoca