GBSSI与glgC融合基因马铃薯转化载体的构建.pdfVIP

摘 要 增加块茎淀粉含量。改良淀粉品质是提高马铃薯工业淀粉利刚效率、拓宽其应用领域的 前提。随着对淀粉生物合成代谢途杼分子生物学机理研究的深入．运用荩闻工=稃途径调控淀 粉生物合成中相关酶的活性增加淀粉含量，改良淀粉品质成为可能。 研究业已表明，在植物中，与淀粉粒结合的淀粉合成酶(GBSSI)是唯一决定贮藏器官中直 链淀粉合成的酶，催化淀粉生物合成底物(ADP．葡萄糖)形成的腺营二磷酸葡钧糖焦磷酸化酶 (AGPase)是淀粉生物合成的限遮酶，其活性受昼夜周期变化的调控：大肠杆菌编码AGPase 的gtgC基因马铃薯体内表达可提高其块茎淀粉含量达60％。为了提高块茎内淀粉含量和获得 制直链淀粉合成，获得糯性淀粉块茎的目的。为此，本论文通过PCR和RT-PCR等方法．获 得了大肠杆菌glgC基因，马铃薯GBSSIeDNA和块茎特异性表达的GBSSI启动子，并分别构 eDNA五个植物转化载体，它们 建了由GBSSI、CaMV35S启动子驱动的glgC和反义GBSSI 分别包含以下融合基因：(DGS跚启动子与GUS融合基因，旨任为块茎生物反应器目的载体 的构建提供基本框架。(甄：aMV35S和GBSSI启动子分别驱动gtgC的融合基因，旨在比较两 eDNA反 个启动子在驱动鲥筘表达，增加块茎淀粉合成的区别；@6丑跚启动子驱动GBSSI 义结构、GBSSI和CaMV35S两个启动子分别驱动gtgC的融合基因，体内表达两融合基因， 淀粉合成的区别。 关键词：淀粉，AGPase，glgC．GBSSI，马铃薯，启动子，载体构建 Abstract Towiden scaleandto utilization is ofpotatostarch,it application upraise efficiency prerequisite thatmbestarchcontentand havetobe W．thfuaher on starch quality upgraded．Alonginvestigation is to Orto starch pathway,itpossibleimprovemodify qualitythrough biosynthesis regulating activities involvedinstarch with ofenzymes biosynthesisapproachofgeneengineering． PreviousstudiesindicatedthatGBSSIisthe for onlyenzymebeingresponsible amylose forstarch biosynthesis．AGPase，rate-limitedenzyme biosynthesis，catalyzesADP-glucose issubstrateforstarch of AGPaseissensitive biosyntbesis,which biosynthesis．Acti